24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

民爱桥

铜虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 542.5
散金: 91
红花: 1
帖子: 92
在线: 88小时
虫号: 1955781
注册: 2012-08-25
性别: MM
专业: 抗炎与免疫药物药理

[求助] 请教有关Westen Blot抗体有关的问题

最近在做蛋白质印迹，要买抗体，什么都不懂，急需各位大神的交流指导。
我们做的是从人细胞中提取出来的蛋白，现在主要存在两个问题：
1 哪家的抗体质量好、价格比较优惠，多数做蛋白的都选择的品牌
2 一抗有很多不同的种属来源，我应该选择同源的，比如我检测的是人细胞蛋白，就选人源的，或者异源的，比如我师兄买的就是兔源的，这个有什么选择标准吗？
本人现在已经研三了，急着做完蛋白这块要毕业了，跪求指导呀！！！

回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

分子生化实验经验积累

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

体外细胞实验检测VEGF delivery 情况已经有6人回复
内参抗体和标签抗体有哪些？已经有6人回复
western blot 显色时，膜的中间有一小块空白区域，是怎么回事？已经有10人回复
纯化抗体的两个问题已经有19人回复
多少细胞可以提蛋白做westen blot？已经有10人回复
westen blot 染色已经有11人回复
westen blot 转膜已经有17人回复
westen blot实验中一抗与二抗用什么稀释已经有4人回复
westen blot实验中一抗与二抗已经有4人回复
关于一抗二抗杂交已经有11人回复
PVDF膜的曝光问题已经有14人回复
关于westen-blot实验的具体步骤及实验中注意的问题，请教！已经有5人回复
【分享】新手上路 Western blot问题集合已经有6人回复
【求助/交流】Westen blot问题请教已经有8人回复
【求助/交流】关于ELISA实验，用biotin直接包被可以吗？已经有6人回复
【求助/交流】western blot、dot blot、slot blot之间的区别已经有3人回复

1楼 2013-09-26 16:21:02

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

hl16010921

木虫 (正式写手)

应助: 100 (初中生)
金币: 2218.4
红花: 8
帖子: 343
在线: 285.2小时
虫号: 2514830
注册: 2013-06-20
性别: GG
专业: 生物化学

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
民爱桥: 金币+10, ★有帮助 2013-09-27 10:59:46
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-09-27 17:10:43
gyesang: 回帖置顶 2013-09-27 17:10:48

1.抗体的选择可以上NCBI检索Protein中你的目的蛋白，右侧有一个抗体的链接（连到http://www.labome.com）上面有该抗体哪些公司有。Abcam不错，但贵。Santa Cruz种类多，浓度低，便宜，但质量波动大。Cell Signaling Technology(CST)质量不错，信号传导和磷酸化抗体是强项。sigma可以提供小包装的，内参抗体不错，价格也可以。关键是不同的抗原各公司的抗体不一定有。我做线虫的抗体就很难找，有的只有一家公司有。
2.抗体种属。一般由于哺乳动物蛋白同源性高，一般的抗体会适用于人，大鼠，小鼠。具体的蛋白针对的种属要查抗体说明书（在各公司网站查）。要注意抗原表位的序列尤其是可能突变的位置。只要标明可用于人均可。查找时可以参考高水平文献用过的抗体。
3.如果没有其他要求，选种属范围大的，可以使实验室其他人或其他实验组都受益。习惯和周围的人交换抗体可以节约成本，而且节约摸条件的时间。帮别人带样或互为对照，有时也挺好的（摸条件且样品不多时）。
4.选好匹配的二抗。
5.最有用的抗体资料是各公司相应的说明书，多读细读。和周围wb的多交流。