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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 天然生物材料 » 体外细胞实验检测VEGF delivery 情况
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tmiao

木虫 (小有名气)

[求助] 体外细胞实验检测VEGF delivery 情况

最近在做growth factor的delivery system，请问各位有没有简单可行的方法检测到底有多少growth factor（这里主要用VEGF）被细胞吸收？western blot 或者pcr? 有没有人做过相关的实验？谢谢
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哈哈
1楼 2013-08-18 01:52:02
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r123ed

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
红舟流星: 金币+1, 欢迎来生物材料板块应助交流 2013-08-18 21:38:47
tmiao: 金币+2 2013-08-19 01:54:31
tmiao(红舟流星代发): 金币+2, 代扣代发金币 2013-11-30 19:32:31
细胞粉碎后用试剂盒吧，买vegf的时候应该都买的吧。或者在vegf上做标记什么的。
westen pcr 一个是蛋白，一个是基因，是后续测表达的。
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shape memory
2楼2013-08-18 20:56:20
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tmiao

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by r123ed at 2013-08-18 00:56:20
细胞粉碎后用试剂盒吧，买vegf的时候应该都买的吧。或者在vegf上做标记什么的。
westen pcr 一个是蛋白，一个是基因，是后续测表达的。

谢谢，那么我还有一个问题想要请教，就是您测过细胞对于VEGF的response么？其实这个是我的主要问题，我们不仅仅是要看有多少进入细胞，关键是细胞接收了VEGF有怎么样的response？所以我才考虑是不是western和PCR可能会有用

谢谢
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哈哈
3楼2013-08-19 01:54:18
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r123ed

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
tmiao: 金币+2 2013-08-20 02:37:58
红舟流星: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎来生物材料板块应助交流 2013-08-20 08:29:45
tmiao(红舟流星代发): 金币+2, 代扣代发金币 2013-11-30 19:32:38
引用回帖:
3楼: Originally posted by tmiao at 2013-08-19 01:54:18
谢谢，那么我还有一个问题想要请教，就是您测过细胞对于VEGF的response么？其实这个是我的主要问题，我们不仅仅是要看有多少进入细胞，关键是细胞接收了VEGF有怎么样的response？所以我才考虑是不是western和PCR可 ...

没记错VEGF是血管内皮因子吧，促血管生成的，体内测试的应该是做个组织切片看一下新生血管数量，这也根据课题组经费啥的。细胞实验跑胶看也行，这你恐怕要查下信号通路，VEGF应该是和经典的TGF的信号通路类似的，对了，还是要看VEGF的机理研究的怎么样，response要根据机理的过程看，而不是单纯的几个基因或者蛋白高表达就说是response，要设计好对照组。
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shape memory
4楼2013-08-19 13:20:05
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tmiao

木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by r123ed at 2013-08-18 17:20:05
没记错VEGF是血管内皮因子吧，促血管生成的，体内测试的应该是做个组织切片看一下新生血管数量，这也根据课题组经费啥的。细胞实验跑胶看也行，这你恐怕要查下信号通路，VEGF应该是和经典的TGF的信号通路类似的，对 ...

谢谢回复，那你有这方面的经验么？你们都用什么reporter cell line？ 信号通路方面你们都看哪些蛋白呢？
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哈哈
5楼2013-08-20 02:37:51
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liuanan

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
红舟流星: 金币+1, 专家考核, 欢迎来生物材料板块应助交流 2013-08-21 17:16:28
tmiao: 金币+1, ★有帮助 2013-08-21 22:41:46
tmiao(红舟流星代发): 金币+1, 代扣代发金币 2013-11-30 19:32:44
VEGF是血管内皮因子吧，促血管生成的，体外细胞实验没有血管怎么检测？血管靶向的材料体外细胞实验往往效果不明显，体内活体实验则会较为明显。
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6楼2013-08-20 23:36:21
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tmiao

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by liuanan at 2013-08-20 03:36:21
VEGF是血管内皮因子吧，促血管生成的，体外细胞实验没有血管怎么检测？血管靶向的材料体外细胞实验往往效果不明显，体内活体实验则会较为明显。

VEGF 会引起细胞基因表达影响~所以没有血管仍然可以检测
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哈哈
7楼2013-08-21 22:42:51
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