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tmiao

木虫 (小有名气)

[求助] 体外细胞实验检测VEGF delivery 情况

最近在做growth factor的delivery system,请问各位有没有简单可行的方法检测到底有多少growth factor(这里主要用VEGF)被细胞吸收?western blot 或者pcr? 有没有人做过相关的实验?谢谢
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哈哈
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r123ed

金虫 (著名写手)

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★ ★ ★ ★ ★
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红舟流星: 金币+1, 欢迎来生物材料板块应助交流 2013-08-18 21:38:47
tmiao: 金币+2 2013-08-19 01:54:31
tmiao(红舟流星代发): 金币+2, 代扣代发金币 2013-11-30 19:32:31
细胞粉碎后用试剂盒吧,买vegf的时候应该都买的吧。或者在vegf上做标记什么的。
westen pcr 一个是蛋白,一个是基因,是后续测表达的。
shape memory
2楼2013-08-18 20:56:20
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tmiao

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by r123ed at 2013-08-18 00:56:20
细胞粉碎后用试剂盒吧,买vegf的时候应该都买的吧。或者在vegf上做标记什么的。
westen pcr 一个是蛋白,一个是基因,是后续测表达的。

谢谢,那么我还有一个问题想要请教,就是您测过细胞对于VEGF的response么?其实这个是我的主要问题,我们不仅仅是要看有多少进入细胞,关键是细胞接收了VEGF有怎么样的response?所以我才考虑是不是western和PCR可能会有用

谢谢
哈哈
3楼2013-08-19 01:54:18
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r123ed

金虫 (著名写手)

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红舟流星: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎来生物材料板块应助交流 2013-08-20 08:29:45
tmiao(红舟流星代发): 金币+2, 代扣代发金币 2013-11-30 19:32:38
引用回帖:
3楼: Originally posted by tmiao at 2013-08-19 01:54:18
谢谢,那么我还有一个问题想要请教,就是您测过细胞对于VEGF的response么?其实这个是我的主要问题,我们不仅仅是要看有多少进入细胞,关键是细胞接收了VEGF有怎么样的response?所以我才考虑是不是western和PCR可 ...

没记错VEGF是血管内皮因子吧,促血管生成的,体内测试的应该是做个组织切片看一下新生血管数量,这也根据课题组经费啥的。细胞实验跑胶看也行,这你恐怕要查下信号通路,VEGF应该是和经典的TGF的信号通路类似的,对了,还是要看VEGF的机理研究的怎么样,response要根据机理的过程看,而不是单纯的几个基因或者蛋白高表达就说是response,要设计好对照组。
shape memory
4楼2013-08-19 13:20:05
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tmiao

木虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by r123ed at 2013-08-18 17:20:05
没记错VEGF是血管内皮因子吧,促血管生成的,体内测试的应该是做个组织切片看一下新生血管数量,这也根据课题组经费啥的。细胞实验跑胶看也行,这你恐怕要查下信号通路,VEGF应该是和经典的TGF的信号通路类似的,对 ...

谢谢回复,那你有这方面的经验么?你们都用什么reporter cell line? 信号通路方面你们都看哪些蛋白呢?
哈哈
5楼2013-08-20 02:37:51
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liuanan

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

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红舟流星: 金币+1, 专家考核, 欢迎来生物材料板块应助交流 2013-08-21 17:16:28
tmiao: 金币+1, 有帮助 2013-08-21 22:41:46
tmiao(红舟流星代发): 金币+1, 代扣代发金币 2013-11-30 19:32:44
VEGF是血管内皮因子吧,促血管生成的,体外细胞实验没有血管怎么检测?血管靶向的材料体外细胞实验往往效果不明显,体内活体实验则会较为明显。
6楼2013-08-20 23:36:21
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tmiao

木虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by liuanan at 2013-08-20 03:36:21
VEGF是血管内皮因子吧,促血管生成的,体外细胞实验没有血管怎么检测?血管靶向的材料体外细胞实验往往效果不明显,体内活体实验则会较为明显。

VEGF 会引起细胞基因表达影响~所以没有血管仍然可以检测
哈哈
7楼2013-08-21 22:42:51
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