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请教有关Westen Blot抗体有关的问题
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民爱桥
铜虫
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(幼儿园)
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帖子: 92
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虫号: 1955781
注册: 2012-08-25
性别:
MM
专业: 抗炎与免疫药物药理
[
求助
]
请教有关Westen Blot抗体有关的问题
最近在做蛋白质印迹,要买抗体,什么都不懂,急需各位大神的交流指导。
我们做的是从人细胞中提取出来的蛋白,现在主要存在两个问题:
1 哪家的抗体质量好、价格比较优惠,多数做蛋白的都选择的品牌
2 一抗有很多不同的种属来源,我应该选择同源的,比如我检测的是人细胞蛋白,就选人源的,或者异源的,比如我师兄买的就是兔源的,这个有什么选择标准吗?
本人现在已经研三了,急着做完蛋白这块要毕业了,跪求指导呀!!!
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1楼
2013-09-26 16:21:02
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hl16010921
木虫
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2013-09-28 02:00:10
民爱桥: 金币+5,
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2013-09-28 09:58:51
引用回帖:
8楼
:
Originally posted by
民爱桥
at 2013-09-27 09:30:46
请问如果我的一抗是单克隆抗体,那我的二抗要选择配套的二抗,还是普通的相同物种来源的就好?...
不可以是同种来源的,同种来源的无法识别,没有小鼠抗小鼠的抗体。二抗要抗一抗的,例如检测人的蛋白a,一抗是小鼠的单抗(可以识别a,人的,大鼠的,狗的),二抗要选,兔抗小鼠,山羊抗小鼠,鸡抗小鼠甚至大鼠抗小鼠。
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10楼
2013-09-27 16:06:40
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cicelyzh
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2013-09-27 09:33:28
kx444555: 金币+1, 鼓励交流
2013-09-27 10:13:22
一般商业化的抗体都比较好,大一点的公司质量更有保证一些。主要是有你要买的抗体就行。至于抗体种属来源,一般而言,同源的可能会比较好,异源有时候也可以用的,主要看你做的蛋白的保守性和抗体制作的方法。如果你做的是人源蛋白,如果有人源相应抗体卖就买人源的。
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民爱桥
2楼
2013-09-27 01:58:35
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lvshilu
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专业: 疫苗学
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2013-09-27 09:33:44
kx444555: 金币+1, 鼓励交流
2013-09-27 10:13:26
Abcam公司
是世界有名的抗体王国,以优质、齐全的产品、完善的网络支持功能和强大的技术支持队伍得到全球客户的认可和赞誉。并在2004年获得了对于生物界公司不可多得的英女王奖,拥有很好的知名度和口碑。
如果你做的不是什么通路研究,一抗的选择上种属没有限制,只要亲和力和,WB效果好就行了。没问题。
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民爱桥
需要金币
3楼
2013-09-27 08:41:23
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2013-09-27 09:33:56
earthox的抗体挺不错的,也是国外的,名字不出名,但价格实惠,我也用过
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民爱桥
我会绕一个圈,走回到实验室
4楼
2013-09-27 09:13:20
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