24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1259  |  回复: 8

tllcu

木虫 (小有名气)

[交流] 用T-RFLP的大侠 已有2人参与

目前正在用T-RFLP做土壤细菌群落多样性,PCR产物还行,但是酶切却怎么也没产物,我是用2%的琼脂糖凝胶跑的酶切产物有没有条带,用的1倍的TBE缓冲液,酶切的各个时间点也都取样检测了(1-8个小时,每个小时取一个样品),都没有条带,不知道什么原因,请各位大侠指教!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

672234993

金虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流! 2013-09-26 09:22:54
琼脂糖电泳的分辨率不够,用聚丙烯酰胺胶电泳或者毛细管电泳就可以看到了。
我会回火星去的,别催我。。。。。。
2楼2013-09-25 20:21:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tllcu

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 672234993 at 2013-09-25 20:21:10
琼脂糖电泳的分辨率不够,用聚丙烯酰胺胶电泳或者毛细管电泳就可以看到了。

聚丙烯酰胺得用多大浓度的呢,你说的毛细管电泳咱们在实验室就自己可以做么,我不是很了解,请多多指教!
3楼2013-09-25 20:34:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiangchou812

木虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流! 2013-09-26 09:23:04
都没有条带是什么意思?如果一条带都没有,那可能是在酶切的过程中你的PCR产物被降解了吧。
4楼2013-09-26 09:13:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

672234993

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by tllcu at 2013-09-25 20:34:42
聚丙烯酰胺得用多大浓度的呢,你说的毛细管电泳咱们在实验室就自己可以做么,我不是很了解,请多多指教!...

一般的实验室不自己做,都是送到公司里面做。而且做T-RFLP的是用的荧光标记的引物,得有识别荧光的设备才行。
我会回火星去的,别催我。。。。。。
5楼2013-09-26 12:02:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tllcu

木虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by xiangchou812 at 2013-09-26 09:13:00
都没有条带是什么意思?如果一条带都没有,那可能是在酶切的过程中你的PCR产物被降解了吧。

是一条条带都没有,怎么才能避免被降解呢,另外用2%的琼脂糖电泳合适么?
6楼2013-09-26 12:30:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiangchou812

木虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-09-28 20:34:35
我觉得是不是先把PCR产物纯化一下,最好是做个胶回收。然后看一下还降解不,不行的话再换一个公司或新买一些内切酶。祝顺利!
7楼2013-09-27 09:08:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tllcu

木虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by xiangchou812 at 2013-09-27 09:08:48
我觉得是不是先把PCR产物纯化一下,最好是做个胶回收。然后看一下还降解不,不行的话再换一个公司或新买一些内切酶。祝顺利!

谢谢!酶切之前的产物都是用试剂盒纯化的,纯化之后有条带,酶切之后什么条带也没有。
8楼2013-09-28 17:24:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiangchou812

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
这样的话,就换一种酶或者换一个公司的酶来试试。
9楼2013-09-29 15:06:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 tllcu 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 调剂 +3 2261744733 2026-04-08 3/150 2026-04-08 20:44 by syjjj0321
[考研] 085404,334分,求调剂 +3 sunjie8888 2026-04-08 3/150 2026-04-08 19:37 by Evan_Liu
[考研] 材料与化工专硕306分找合适调剂 +25 沧海轻舟e 2026-04-06 25/1250 2026-04-08 18:52 by 环化材-小生
[考研] 331求调剂 +3 luoxin0706. 2026-04-08 3/150 2026-04-08 17:20 by -迷了路啊路
[考研] 材料工程322分 +16 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-01 16/800 2026-04-08 16:34 by luoyongfeng
[考研] 一志愿085404,总分291,四级已过,求调剂 +9 阿俊阿俊阿俊 2026-04-04 11/550 2026-04-08 10:56 by 学员Xf6pzY
[考研] 生物学363调剂求助 +7 fanzhang6666 2026-04-06 9/450 2026-04-07 17:37 by lijunpoly
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-04-07 11/550 2026-04-07 15:13 by shdgaomin
[考研] 调剂 +4 mcbbc 2026-04-06 5/250 2026-04-07 12:33 by upczlm1989
[考研] 材料调剂 +5 小刘同学吖吖 2026-04-06 5/250 2026-04-06 18:34 by sherry_1901
[考研] 材料334求调剂 +19 Eecho# 2026-04-03 19/950 2026-04-06 08:37 by 小小树2024
[考研] 298求调剂 +7 manman511 2026-04-05 7/350 2026-04-05 10:29 by 唐沐儿
[考研] 323分(计算机视觉和大模型项目)能直接上手 +3 chaoxiicy 2026-04-01 3/150 2026-04-05 00:50 by chongya
[考研] 301求调剂 +18 骆驼男人 2026-04-02 18/900 2026-04-04 20:33 by 蓝云思雨
[考研] 求生物学专业调剂-332分 +5 云朵遛弯指南 2026-04-04 5/250 2026-04-04 10:05 by rzh123456
[考研] 求调剂,一志愿北京中医药大学 +3 小小达不溜 2026-04-02 3/150 2026-04-03 22:55 by 冲矢昴星团
[考研] 考研调剂 +3 15615482637 2026-04-03 3/150 2026-04-03 22:50 by ms629
[考研] 兽医调剂 +3 wh119216 2026-04-02 3/150 2026-04-03 19:34 by zrongyan
[考研] 260求调剂 +6 朱芷琳 2026-04-02 6/300 2026-04-02 20:27 by 6781022
[考研] 348环境工程调剂 +3 吴彦祖24k 2026-04-01 3/150 2026-04-02 09:14 by nanaliuyun
信息提示
请填处理意见