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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 枯草芽孢杆菌整合质粒pAX01的使用
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hyyws

木虫 (正式写手)

[求助] 枯草芽孢杆菌整合质粒pAX01的使用 已有3人参与

准备在枯草芽孢杆菌中整合表达一个外源基因。组长让用整合质粒pAX01进行整合表达。以前没做过整合表达，就想请教高手们，整合表达应该注意些什么问题。
看了下文献，需要事先构建表达元件，启动子打算用p43，请问一下还要准备信号肽吗？还需要准备终止子吗？pAX01上有这些表达元件吗？对这个质粒也认识不多，还请使用过的前辈多多指点！
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1楼 2013-09-17 17:08:45
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cai120320

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

您好，请问pAX01整合到基因组上是单拷贝吗？
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7楼2015-09-02 17:16:45
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余小霞yxx

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
hyyws: 金币+20, ★有帮助 2014-03-22 12:53:51
我做过一段时间枯草芽胞杆菌的整合，不过我用的载体是购买的，外源质粒整合进枯草芽孢杆菌基因组主要分为单交换和双交换，不管哪种交换中，所选用的同源臂是非常重要的，直接决定了你的整合效率，当然质粒载体中启动子和终止子肯定是必要的，信号肽的话看你是要外泌还是胞内？
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枯草芽孢杆菌
2楼2014-03-20 10:06:28
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hyyws

木虫 (正式写手)
谢谢您的回复。最近组长又让做别的了。这个实验暂时搁置。以后做到了再具体想您请教，还望您到时不吝赐教！
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3楼2014-03-22 12:53:11
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余小霞yxx

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by hyyws at 2014-03-22 12:53:11
谢谢您的回复。最近组长又让做别的了。这个实验暂时搁置。以后做到了再具体想您请教，还望您到时不吝赐教！

不客气，相互交流相互学习，我的硕士论文正是做枯草启动子
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枯草芽孢杆菌
4楼2014-04-18 16:37:27
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