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yaoxuexuezi

至尊木虫 (职业作家)

[求助] 求助RAW264.7细胞NF-KB通路的问题

我在用RAW264.7细胞做抗炎研究，想做NF-KB通路，摸索了好长时间，有些蛋白已经做出来了，但是P-ikk,P-P65等几个指标蛋白条带始终不是很清楚，想问一下做过这方面实验的，LPS刺激细胞时使用的浓度是多少？刺激时间多久？western时上样量多少？

[ 来自小组 药学家园 ]
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1楼 2013-09-13 14:51:54
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爱知识-圆圆

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by yaoxuexuezi at 2013-09-14 15:01:09
不同的蛋白貌似表达量不一样吧，western时已经上样量很大了但是有些蛋白还是没跑出来，看你专业应该是专家，能给个QQ向您请教下吗？...

我不是专家啊，我也是新手。你的QQ是？
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whatever I do,do my best!
6楼2013-09-15 20:24:36
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风中的羽翼_

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
yaoxuexuezi: 金币+1, 博学EPI+1 2013-09-13 21:52:29
我实验没做出来，我从文献了解到应该用0.1-10μg/ml的浓度
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2楼2013-09-13 20:25:18
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爱知识-圆圆

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
yaoxuexuezi: 金币+1, 一样的上样量但是有的跑出来了有的没有 2013-09-14 15:00:35
你前面的蛋白不是做出来了吗，一样的条件做不出来吗？
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whatever I do,do my best!
3楼2013-09-14 10:41:03
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爱知识-圆圆

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
yaoxuexuezi: 金币+2, 不同的蛋白貌似表达量不一样吧，western时已经上样量很大了但是有些蛋白还是没跑出来，看你专业应该是专家，能给个QQ向您请教下吗？ 2013-09-14 15:00:06
引用回帖:
3楼: Originally posted by 爱知识-圆圆 at 2013-09-14 10:41:03
你前面的蛋白不是做出来了吗，一样的条件做不出来吗？

我用的是10μg/ml,文献里面有很多有的是1μg/ml
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whatever I do,do my best!
4楼2013-09-14 10:41:58
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