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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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yaoxuexuezi

至尊木虫 (职业作家)

[求助] 求助RAW264.7细胞NF-KB通路的问题

我在用RAW264.7细胞做抗炎研究,想做NF-KB通路,摸索了好长时间,有些蛋白已经做出来了,但是P-ikk,P-P65等几个指标蛋白条带始终不是很清楚,想问一下做过这方面实验的,LPS刺激细胞时使用的浓度是多少?刺激时间多久?western时上样量多少?

[ 来自小组 药学家园 ]

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爱知识-圆圆

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


yaoxuexuezi: 金币+1, 一样的上样量但是有的跑出来了有的没有 2013-09-14 15:00:35
你前面的蛋白不是做出来了吗,一样的条件做不出来吗?
whatever I do,do my best!
3楼2013-09-14 10:41:03
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风中的羽翼_

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


yaoxuexuezi: 金币+1, 博学EPI+1 2013-09-13 21:52:29
我实验没做出来,我从文献了解到应该用0.1-10μg/ml的浓度
2楼2013-09-13 20:25:18
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爱知识-圆圆

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
yaoxuexuezi: 金币+2, 不同的蛋白貌似表达量不一样吧,western时已经上样量很大了但是有些蛋白还是没跑出来,看你专业应该是专家,能给个QQ向您请教下吗? 2013-09-14 15:00:06
引用回帖:
3楼: Originally posted by 爱知识-圆圆 at 2013-09-14 10:41:03
你前面的蛋白不是做出来了吗,一样的条件做不出来吗?

我用的是10μg/ml,文献里面有很多有的是1μg/ml
whatever I do,do my best!
4楼2013-09-14 10:41:58
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yaoxuexuezi

至尊木虫 (职业作家)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 爱知识-圆圆 at 2013-09-14 10:41:58
我用的是10μg/ml,文献里面有很多有的是1μg/ml...

不同的蛋白貌似表达量不一样吧,western时已经上样量很大了但是有些蛋白还是没跑出来,看你专业应该是专家,能给个QQ向您请教下吗?
5楼2013-09-14 15:01:09
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