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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 液相 流动相高盐 对色谱柱的影响
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丁德军

新虫 (初入文坛)

[求助] 液相 流动相高盐 对色谱柱的影响

请教：在液相色谱中  是不是色谱柱越短，孔径越小  对流动相的变化越敏感。       原先是(C18  4.6*250    5um) 的柱子     换了UPLC后   是（C18   2.1*10   3.5um)的柱子   。方法转换后，梯度时发现在B相浓度最高的时候基线往上走。  在HPLC上没有此现象。


2：换了短的色谱柱后，色谱柱寿命实在太短了  300多针就不行了   出现严重拖尾现象，流动相中含有氯化钠    有影响吗  

3：流动相为高盐   含有磷酸盐    氯化钠等      用啥柱子好     
      样品分子量在6000左右，蛋白类
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1楼 2013-08-28 21:55:42
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琉心净月

铜虫 (初入文坛)
你做完冲洗柱子的方法对不对呢？
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2楼2013-08-29 09:33:43
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j115090587

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
会影响大一点的，更灵敏嘛
氯化钠是不是可以代替
可以考虑A,B都加点盐
做好以后多冲洗一下
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3楼2013-08-29 17:09:59
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丁德军

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 琉心净月 at 2013-08-29 09:33:43
你做完冲洗柱子的方法对不对呢？

做完了都立即用5%甲醇水冲洗了色谱柱     不过我们做一次时间比较长  
  10个小时左右
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4楼2013-08-29 21:34:28
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丁德军

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by j115090587 at 2013-08-29 17:09:59
会影响大一点的，更灵敏嘛
氯化钠是不是可以代替
可以考虑A,B都加点盐
做好以后多冲洗一下

不可以替代的啊    AB相都有 盐    只是比例不一样而已
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5楼2013-08-29 21:35:56
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zds316

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
那种短柱子使用的时候，如果有缓冲盐，有机相比例高的话，很容易导致盐析的，柱子也会堵住的，柱压升高很多。
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http://emuch.net/bbs/viewthread.php?tid=3133586
6楼2013-08-30 10:59:56
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j115090587

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 丁德军 at 2013-08-29 21:35:56
不可以替代的啊    AB相都有 盐    只是比例不一样而已...

那说明你们该注意的已经注意啦，剩下的就是冲洗的了，还有分析方法不能变的话，柱子就算投入的消耗品吧，淡定点就好！
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7楼2013-09-01 09:49:58
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丁德军

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by j115090587 at 2013-09-01 09:49:58
那说明你们该注意的已经注意啦，剩下的就是冲洗的了，还有分析方法不能变的话，柱子就算投入的消耗品吧，淡定点就好！...

  汗    300针就废了 伤不起啊    4K大洋一根，
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8楼2013-09-04 20:42:40
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j115090587

金虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 丁德军 at 2013-09-04 20:42:40
  汗    300针就废了 伤不起啊    4K大洋一根，...

还好，十几块一次诶
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9楼2013-09-05 08:43:28
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