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莘莘小白蚁

新虫 (小有名气)

[求助] 液相测游离氨基酸和肌苷酸

问题1:HPLC测猪肉肌苷酸有哪些好的方法?查网上有如下条件:

       1 仪器
            液相色谱仪 Waters600(Alliance HPLC,美国)
      2 色谱柱 Diamonsil C18(250×4.6mm,5μm)。
      3 流动相
            0.05mol/L 磷酸三乙胺、5%甲醇溶液:取磷酸 3.5mL,加入 200mL 纯水和 7.2mL三乙胺(99%纯度),摇匀。混合后加纯水至 1000mL,用三乙胺调 pH 至 6.5 后,取出950mL 加入 50mL 色谱纯甲醇,混匀,经Φ=0.5μm 滤膜过滤,置超声波水浴中脱气30min,备用。
            这个条件合适吗?听说加三乙胺对柱子会产生有害影响是吗?
问题2:
       想用HPLC测肉里的游离氨基酸,提取剂是5%磺基水杨酸,想问下虽然调回pH值到中性,但是残留的磺基水杨酸会对C18反向硅胶柱产生影响吗?请赐教。
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jinyincao

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
莘莘小白蚁: 金币+5, 博学EPI+1, ★★★很有帮助 2013-08-18 21:03:25
你为什么不查一下文献呢?譬如《分析化学》期刊里的文章?有些网上说的方法不是很准的,游离氨基酸一般是用三氯乙酸提取的吧。我看到一篇《高效液相色谱法测定大豆中游离氨基酸含量》的文章里讲到怎样提取游离氨基酸以及色谱条件的内容。http://wenku.baidu.com/view/43aa770690c69ec3d5bb751e.html
坚持科研路
2楼2013-08-17 20:27:22
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