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莘莘小白蚁

新虫 (小有名气)

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[求助] 液相测游离氨基酸和肌苷酸

问题1：HPLC测猪肉肌苷酸有哪些好的方法？查网上有如下条件：

   1 仪器
         液相色谱仪 Waters600（Alliance HPLC，美国）
   2 色谱柱 Diamonsil C18（250×4.6mm，5μm）。
   3 流动相
         0.05mol/L 磷酸三乙胺、5%甲醇溶液：取磷酸 3.5mL，加入 200mL 纯水和 7.2mL三乙胺（99%纯度），摇匀。混合后加纯水至 1000mL，用三乙胺调 pH 至 6.5 后，取出950mL 加入 50mL 色谱纯甲醇，混匀，经Φ=0.5μm 滤膜过滤，置超声波水浴中脱气30min，备用。
         这个条件合适吗？听说加三乙胺对柱子会产生有害影响是吗?
问题2：
   想用HPLC测肉里的游离氨基酸，提取剂是5%磺基水杨酸，想问下虽然调回pH值到中性，但是残留的磺基水杨酸会对C18反向硅胶柱产生影响吗？请赐教。

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1楼 2013-08-16 22:08:19

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jinyincao

铁杆木虫 (正式写手)

博学EPI: 1
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专业: 食品科学

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
莘莘小白蚁: 金币+5, 博学EPI+1, ★★★很有帮助 2013-08-18 21:03:25

你为什么不查一下文献呢？譬如《分析化学》期刊里的文章？有些网上说的方法不是很准的，游离氨基酸一般是用三氯乙酸提取的吧。我看到一篇《高效液相色谱法测定大豆中游离氨基酸含量》的文章里讲到怎样提取游离氨基酸以及色谱条件的内容。http://wenku.baidu.com/view/43aa770690c69ec3d5bb751e.html

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坚持科研路

2楼2013-08-17 20:27:22

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