应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 真菌DNA提取老是被降解掉了，请支招儿
51/1返回列表
查看: 1062  |  回复: 6
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

christll

新虫 (初入文坛)

[交流] 真菌DNA提取老是被降解掉了，请支招儿

本人最近在做真菌的DNA 提取，遇到问题具体如下： 前期步骤应该都没多大问题，在用预冷的无水乙醇沉淀时，混匀几下，出现预想的白色絮状物，经经验判断为DNA絮状物，挑出来用75%的乙醇漂洗之后，真空30°烘干。溶解100ul的dH2O中，跑胶验证。  问题是：絮状物的量是比较大量的，但是跑胶来看DNA的条带亮度非常弱，加过RNase处理之后再跑胶，什么都没有了。 请问各位有没有遇到类似的情况，问题出现在哪里呢，我做了3次都是这样子。谢谢各位了！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼2013-08-14 21:52:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Fleaves

至尊木虫 (著名写手)
★
christll(金币+1): 谢谢参与
不太可能吧，DNA都讲解这么厉害？
赞一下 回复此楼
4楼2013-08-14 23:41:22
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

wswsjz

木虫 (职业作家)
★
christll(金币+1): 谢谢参与
祝福，努力发论文！
回复此楼
2楼2013-08-14 22:42:21
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longrna

新虫 (正式写手)
★
christll(金币+1): 谢谢参与
絮状沉淀可能是DNA，也有可能是多糖类的杂质。
有些真菌的DNA不好提，多糖含量多，尝试换其他的裂解液或方法。
你用水溶解再用RNase消化，本来提取的DNA可能量就非常弱，而如果你的RNase含有DNase 污染的情况下，也是很容易将你本就非常弱的DNA一同消化掉。
建议使用TE溶解DNA（体积先不要用100ul那么多），RNase消化前可90度先处理RNase灭活其中的DNase。
赞一下 回复此楼
6楼2013-08-15 08:40:20
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

花雨sky

金虫 (小有名气)
★
christll(金币+1): 谢谢参与
前一段时间一直跟着师姐做微生物DNA提取，提出来后的DNA量比较少，你用的什么方法？可以加些TE清洗下，去除杂质，最后DNA置于超级工作台吹干或者晾干试试
赞一下 回复此楼
7楼2013-08-15 20:52:41
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复(可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭