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萌萌李萌萌

金虫 (小有名气)

[求助] BL21菌株进行甘油保存时,需要加入卡那霉素吗?如需,加入的浓度是多少?

各位战友,求助,问题如标题所示,BL21菌株内含PET30a质粒,需要进行保存,用甘油保存的话,需要加入多少抗生素呢?烦请大家帮助一下!
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bujunyang

木虫 (正式写手)

卓尔不群

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助! 2013-08-06 08:38:02
萌萌李萌萌: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-08-06 09:04:40
一般15-20%的甘油,-80冻存,甘油浓度高了容易引起突变,低了会造成细胞膜的损伤,引起死亡。菌株最好半年活化一次(我们实验室一放几年不活化,也没问题,如果是重要的菌株还是定期活化的好)。至于抗生素,摇菌时是加的,然后直接把甘油加到菌液中就可以了,不需要补加。
来是偶然,去是必然。
7楼2013-08-06 05:10:37
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秋水素心

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
萌萌李萌萌: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-08-05 19:46:57
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助! 2013-08-06 08:37:32
不需要再额外加抗生素的,我没加过,直接按比例将菌液加入灭菌好的甘油就好
认真过好每一天!
2楼2013-08-05 19:35:44
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萌萌李萌萌

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 秋水素心 at 2013-08-05 19:35:44
不需要再额外加抗生素的,我没加过,直接按比例将菌液加入灭菌好的甘油就好

不加抗生素的话,不用担心质粒丢失吗?我看着小木虫里众说纷纭,请问你有没有具体的保存步骤或者参考文献?谢谢
3楼2013-08-05 19:46:45
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秋水素心

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 萌萌李萌萌 at 2013-08-05 19:46:45
不加抗生素的话,不用担心质粒丢失吗?我看着小木虫里众说纷纭,请问你有没有具体的保存步骤或者参考文献?谢谢...

加入甘油后,直接-80度冻存
认真过好每一天!
4楼2013-08-05 19:48:54
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