应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » BL21菌株进行甘油保存时，需要加入卡那霉素吗？如需，加入的浓度是多少？
121/2返回列表12下一页
查看: 2794  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

萌萌李萌萌

金虫 (小有名气)

[求助] BL21菌株进行甘油保存时，需要加入卡那霉素吗？如需，加入的浓度是多少？

各位战友，求助，问题如标题所示，BL21菌株内含PET30a质粒，需要进行保存，用甘油保存的话，需要加入多少抗生素呢？烦请大家帮助一下！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-08-05 17:03:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

秋水素心

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
萌萌李萌萌: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-08-05 19:46:57
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助！ 2013-08-06 08:37:32
不需要再额外加抗生素的，我没加过，直接按比例将菌液加入灭菌好的甘油就好
赞一下(1人) 回复此楼
认真过好每一天！
2楼2013-08-05 19:35:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

萌萌李萌萌

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 秋水素心 at 2013-08-05 19:35:44
不需要再额外加抗生素的，我没加过，直接按比例将菌液加入灭菌好的甘油就好

不加抗生素的话，不用担心质粒丢失吗？我看着小木虫里众说纷纭，请问你有没有具体的保存步骤或者参考文献？谢谢
赞一下 回复此楼
3楼2013-08-05 19:46:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

秋水素心

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 萌萌李萌萌 at 2013-08-05 19:46:45
不加抗生素的话，不用担心质粒丢失吗？我看着小木虫里众说纷纭，请问你有没有具体的保存步骤或者参考文献？谢谢...

加入甘油后，直接-80度冻存
赞一下 回复此楼
认真过好每一天！
4楼2013-08-05 19:48:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

萌萌李萌萌

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 秋水素心 at 2013-08-05 19:48:54
加入甘油后，直接-80度冻存...

-80℃条件下，15%的甘油浓度，-20℃条件下，50%的甘油浓度？菌液里面含有50ug/ml的卡那霉素，所以不用另外加抗生素了？
正常的菌株保存，不是将菌液先在平板上划线，然后单菌落再划到斜面上，然后再用棉棒刮取斜面上的菌体放入不同浓度甘油保存液中吗？
这种重组的细菌，直接液体增殖后，用增殖液保存就可以了？？
好不意思，我是初学者，问题较多！
赞一下 回复此楼
5楼2013-08-05 19:59:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助！ 2013-08-06 08:37:49
萌萌李萌萌: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-08-06 09:04:30
摇菌时要加抗生素。摇好的菌液与甘油按照比例混合时不用补抗生素了。在-80°C菌是不扩增的，不存在质粒丢失问题。
赞一下 回复此楼
6楼2013-08-06 00:21:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bujunyang

木虫 (正式写手)

卓尔不群

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助！ 2013-08-06 08:38:02
萌萌李萌萌: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-08-06 09:04:40
一般15-20%的甘油，-80冻存，甘油浓度高了容易引起突变，低了会造成细胞膜的损伤，引起死亡。菌株最好半年活化一次(我们实验室一放几年不活化，也没问题，如果是重要的菌株还是定期活化的好)。至于抗生素，摇菌时是加的，然后直接把甘油加到菌液中就可以了，不需要补加。
赞一下 回复此楼
来是偶然，去是必然。
7楼2013-08-06 05:10:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

萌萌李萌萌

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by bujunyang at 2013-08-06 05:10:37
一般15-20%的甘油，-80冻存，甘油浓度高了容易引起突变，低了会造成细胞膜的损伤，引起死亡。菌株最好半年活化一次(我们实验室一放几年不活化，也没问题，如果是重要的菌株还是定期活化的好)。至于抗生素，摇菌时是 ...

你好，请问，如果保存在-20℃，需要多大浓度的甘油呢？有人告诉我是50%，然后-20℃条件下的，可以经常拿出来用，但是-80℃条件下的，尽量不要使用了。这样子对吗？
谢谢
赞一下 回复此楼
8楼2013-08-06 09:07:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bujunyang

木虫 (正式写手)

卓尔不群

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
萌萌李萌萌: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-08-11 11:26:46
引用回帖:
8楼: Originally posted by 萌萌李萌萌 at 2013-08-06 02:07:21
你好，请问，如果保存在-20℃，需要多大浓度的甘油呢？有人告诉我是50%，然后-20℃条件下的，可以经常拿出来用，但是-80℃条件下的，尽量不要使用了。这样子对吗？
谢谢...

-20℃条件下也是一样的浓度，你想想温度低了，冻伤小了，怎么反而增加甘油浓度呢，只不过-20℃保存的时间要短些
赞一下 回复此楼
来是偶然，去是必然。
9楼2013-08-08 04:56:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhupanlinjie

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
萌萌李萌萌: 金币+2 2013-08-11 11:27:06
一般不用添加抗生素！
赞一下 回复此楼
10楼2013-08-11 09:57:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 萌萌李萌萌 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:47 by yCO1Ll7aHtsw
[博后之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 16:30 by etmYJ6d2rquH
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 16:03 by etmYJ6d2rquH
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 4/200 2026-09-29 15:15 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 15:04 by etmYJ6d2rquH
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 6/300 2026-09-29 14:41 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 7/350 2026-09-29 14:07 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 3/150 2026-09-29 13:56 by etmYJ6d2rquH
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-29 13:50 by etmYJ6d2rquH
[教师之家] 某top大学教授说“能够在市场中兑现的能力才是真能力”无比同意！ +8 zju2000 2026-09-26 9/450 2026-09-29 13:47 by ahsoarli
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 09:59 by JzYBbHIXWSrW
[教师之家] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 4/200 2026-09-29 09:49 by JzYBbHIXWSrW
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:42 by ZvyPK8n6Nfki
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:28 by ZvyPK8n6Nfki
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:46 by b8fCuTHqckEt
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[有机交流] 同一个分子，一条来自文献，一条来自AI——不告诉你答案，你会选哪条？ +3 tianxiaoxian 2026-09-28 6/300 2026-09-28 22:44 by tianxiaoxian
[找工作] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-28 22:32 by ez6fGg9abYaj
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 3/150 2026-09-28 22:21 by ez6fGg9abYaj
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-28 22:15 by ez6fGg9abYaj
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭