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金虫 (小有名气)

[求助] BL21菌株进行甘油保存时，需要加入卡那霉素吗？如需，加入的浓度是多少？

各位战友，求助，问题如标题所示，BL21菌株内含PET30a质粒，需要进行保存，用甘油保存的话，需要加入多少抗生素呢？烦请大家帮助一下！

1楼 2013-08-05 17:03:30

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木虫 (正式写手)

卓尔不群

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感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助！ 2013-08-06 08:38:02
萌萌李萌萌: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-08-06 09:04:40

一般15-20%的甘油，-80冻存，甘油浓度高了容易引起突变，低了会造成细胞膜的损伤，引起死亡。菌株最好半年活化一次(我们实验室一放几年不活化，也没问题，如果是重要的菌株还是定期活化的好)。至于抗生素，摇菌时是加的，然后直接把甘油加到菌液中就可以了，不需要补加。

来是偶然，去是必然。

7楼2013-08-06 05:10:37

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木虫 (正式写手)

卓尔不群

★ ★ ★ ★ ★
萌萌李萌萌: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-08-11 11:26:46

引用回帖:

8楼: Originally posted by 萌萌李萌萌 at 2013-08-06 02:07:21
你好，请问，如果保存在-20℃，需要多大浓度的甘油呢？有人告诉我是50%，然后-20℃条件下的，可以经常拿出来用，但是-80℃条件下的，尽量不要使用了。这样子对吗？
谢谢...

-20℃条件下也是一样的浓度，你想想温度低了，冻伤小了，怎么反而增加甘油浓度呢，只不过-20℃保存的时间要短些

来是偶然，去是必然。

9楼2013-08-08 04:56:41

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