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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » BL21菌株进行甘油保存时，需要加入卡那霉素吗？如需，加入的浓度是多少？
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萌萌李萌萌

金虫 (小有名气)

[求助] BL21菌株进行甘油保存时，需要加入卡那霉素吗？如需，加入的浓度是多少？

各位战友，求助，问题如标题所示，BL21菌株内含PET30a质粒，需要进行保存，用甘油保存的话，需要加入多少抗生素呢？烦请大家帮助一下！
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1楼 2013-08-05 17:03:30
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萌萌李萌萌

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 秋水素心 at 2013-08-05 19:35:44
不需要再额外加抗生素的，我没加过，直接按比例将菌液加入灭菌好的甘油就好

不加抗生素的话，不用担心质粒丢失吗？我看着小木虫里众说纷纭，请问你有没有具体的保存步骤或者参考文献？谢谢
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3楼2013-08-05 19:46:45
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秋水素心

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
萌萌李萌萌: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-08-05 19:46:57
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助！ 2013-08-06 08:37:32
不需要再额外加抗生素的，我没加过，直接按比例将菌液加入灭菌好的甘油就好
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认真过好每一天！
2楼2013-08-05 19:35:44
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秋水素心

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 萌萌李萌萌 at 2013-08-05 19:46:45
不加抗生素的话，不用担心质粒丢失吗？我看着小木虫里众说纷纭，请问你有没有具体的保存步骤或者参考文献？谢谢...

加入甘油后，直接-80度冻存
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认真过好每一天！
4楼2013-08-05 19:48:54
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萌萌李萌萌

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 秋水素心 at 2013-08-05 19:48:54
加入甘油后，直接-80度冻存...

-80℃条件下，15%的甘油浓度，-20℃条件下，50%的甘油浓度？菌液里面含有50ug/ml的卡那霉素，所以不用另外加抗生素了？
正常的菌株保存，不是将菌液先在平板上划线，然后单菌落再划到斜面上，然后再用棉棒刮取斜面上的菌体放入不同浓度甘油保存液中吗？
这种重组的细菌，直接液体增殖后，用增殖液保存就可以了？？
好不意思，我是初学者，问题较多！
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5楼2013-08-05 19:59:01
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