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萌萌李萌萌

金虫 (小有名气)

[求助] BL21菌株进行甘油保存时,需要加入卡那霉素吗?如需,加入的浓度是多少?

各位战友,求助,问题如标题所示,BL21菌株内含PET30a质粒,需要进行保存,用甘油保存的话,需要加入多少抗生素呢?烦请大家帮助一下!
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秋水素心

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 萌萌李萌萌 at 2013-08-05 19:46:45
不加抗生素的话,不用担心质粒丢失吗?我看着小木虫里众说纷纭,请问你有没有具体的保存步骤或者参考文献?谢谢...

加入甘油后,直接-80度冻存
认真过好每一天!
4楼2013-08-05 19:48:54
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秋水素心

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
萌萌李萌萌: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-08-05 19:46:57
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助! 2013-08-06 08:37:32
不需要再额外加抗生素的,我没加过,直接按比例将菌液加入灭菌好的甘油就好
认真过好每一天!
2楼2013-08-05 19:35:44
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萌萌李萌萌

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 秋水素心 at 2013-08-05 19:35:44
不需要再额外加抗生素的,我没加过,直接按比例将菌液加入灭菌好的甘油就好

不加抗生素的话,不用担心质粒丢失吗?我看着小木虫里众说纷纭,请问你有没有具体的保存步骤或者参考文献?谢谢
3楼2013-08-05 19:46:45
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萌萌李萌萌

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 秋水素心 at 2013-08-05 19:48:54
加入甘油后,直接-80度冻存...

-80℃条件下,15%的甘油浓度,-20℃条件下,50%的甘油浓度?菌液里面含有50ug/ml的卡那霉素,所以不用另外加抗生素了?
正常的菌株保存,不是将菌液先在平板上划线,然后单菌落再划到斜面上,然后再用棉棒刮取斜面上的菌体放入不同浓度甘油保存液中吗?
这种重组的细菌,直接液体增殖后,用增殖液保存就可以了??
好不意思,我是初学者,问题较多!
5楼2013-08-05 19:59:01
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