| 查看: 784 | 回复: 2 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
hwchen2000金虫 (正式写手)
|
[求助]
单条3-race通用引物扩增出5-6个条带，有没有
|
|
|
各位大侠，最近在做PCR，本来是想做3-race的，没做出来，后来受坛子里的一个虫友启发，只用巢式引物和3-通用引物扩增出6个条带，结果测序结果回来不可思议，上游引物居然就是3-通用引物的互补序列，下游引物就是3-通用引物，后来用3-通用引物做单引物扩增，这6个条带居然全扩出来，真是奇葩了，有没有筒子能解释一下啊 3-通用引物5'-GCTGTCAACGATACGCTACGTAACGGCATGACAGTG (T)18-3' |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有96人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求3‘RACE引物设计
已经有4人回复
- dgge最后一次分离切胶后用不带GC夹子引物扩增不出目的条带
已经有20人回复
- 3‘RACE出现了单引物扩增
已经有7人回复
- 求助，关于pcr扩增后产物序列在ncbi上的比对，以及3' race接头引物的设计。。
已经有6人回复
- 求助：PCR扩增片段测序结果引物中间多出150bp的片段
已经有5人回复
- 高氏一号分离的菌用16S通用引物扩增不出条带
已经有9人回复
- 3’RACE扩增技术
已经有14人回复
- 反向PCR之单引物扩增，真悲剧
已经有15人回复
- 通用引物扩增细菌16S rDNA
已经有13人回复
- 请问AFLP的选择性扩增引物的第一个选择性碱基为什么是A和C
已经有6人回复
- 如何设计引物，扩增目的基因的ORF？
已经有6人回复
- 16s rDNA 扩增引物的选择
已经有9人回复
- 【求助/交流】有引物二聚体、非特异性扩增带是怎么回事？
已经有10人回复
hwchen2000
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1950.5
- 帖子: 444
- 在线: 89.7小时
- 虫号: 216162
- 注册: 2006-03-11
- 专业: 生物化学与分子生物学
送红花一朵 
3楼2013-07-22 10:33:57
bullfrog325
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 193 (高中生)
- 金币: 2880.3
- 散金: 200
- 红花: 24
- 帖子: 744
- 在线: 269.5小时
- 虫号: 1864929
- 注册: 2012-06-20
【答案】应助回帖
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-07-20 21:46:21
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-07-20 21:46:21
|
巢式PCR第一轮的时候如果有非特异的引物/模板结合, 这种PCR产物就会在第二轮继续被扩增. 楼主的第一轮巢式PCR温度太低了. 通用引物里面的poly-T和模板末端的poly-A(对应原来mRNA的poly-A)这种结合是你希望发生的, 但是如果有某个cDNA中间也有和poly-A相似序列, 你的通用引物也可以勉强集合上, 只要这个发生就会给下面的PCR提供模板. |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
2楼2013-07-20 18:43:42
30