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laolaohutu

银虫 (正式写手)

[求助] 如何设计In-Fusion引物

如何设计In-Fusion引物？设计的引物要求引物的5’末端必须包含与载体末端相同的15个碱基序列，引物的3’末端必须包含与目的基因片段相互补的特异碱基序列，如此一来引物不是有三四十个？不知如何根据已有的EST或者是已带有酶切位点的全长序列设计In-Fusion引物?如何优化设计的引物？
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1楼 2013-07-19 21:55:06
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俊锋

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by neoandkidd at 2013-07-20 19:40:07
啊呀，刚看到，早知道问我了，IN-FUSION我都使用的很熟练了，单基因，多基因，融合表达等等都没问题啊

LZ请问楼主，现在还在做实验吗？做IN-fusion实验，连接转化的实验，目的500bp与载体puc19连接时，出现连接是空载，体系：pRACE vector:1.0ul  DNA:7.0ul In-fusion Master Mix：2.0 ul；共10ul。连接50摄氏度，15min
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9楼2016-06-08 10:02:54
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liyongliangx

铜虫 (小有名气)
in-fusion 是什么？
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2楼2013-07-19 22:09:54
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bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laolaohutu: 金币+5, ★有帮助 2013-07-20 08:50:11
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-07-20 11:59:30
是的, 这种引物一般都很长, 甚至到60bp都会发生.
引物设计实际上没有太多选择, 因为你要做的融合P产物序列都是确定的, 引物起的作用只是把片段连起来而已.
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3楼2013-07-20 01:07:39
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)
引物三四十算啥。。    80+一样P
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4楼2013-07-20 02:34:10
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