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laolaohutu

银虫 (正式写手)

[求助] 如何设计In-Fusion引物

如何设计In-Fusion引物?设计的引物要求引物的5’末端必须包含与载体末端相同的15个碱基序列,引物的3’末端必须包含与目的基因片段相互补的特异碱基序列,如此一来引物不是有三四十个?不知如何根据已有的EST或者是已带有酶切位点的全长序列设计In-Fusion引物?如何优化设计的引物?
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俊锋

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by neoandkidd at 2013-07-20 19:40:07
啊呀,刚看到,早知道问我了,IN-FUSION我都使用的很熟练了,单基因,多基因,融合表达等等都没问题啊

LZ请问楼主,现在还在做实验吗?做IN-fusion实验,连接转化的实验,目的500bp与载体puc19连接时,出现连接是空载,体系:pRACE vector:1.0ul  DNA:7.0ul In-fusion Master Mix:2.0 ul;共10ul。连接50摄氏度,15min
9楼2016-06-08 10:02:54
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liyongliangx

铜虫 (小有名气)

in-fusion 是什么?
2楼2013-07-19 22:09:54
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bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laolaohutu: 金币+5, 有帮助 2013-07-20 08:50:11
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-07-20 11:59:30
是的, 这种引物一般都很长, 甚至到60bp都会发生.
引物设计实际上没有太多选择, 因为你要做的融合P产物序列都是确定的, 引物起的作用只是把片段连起来而已.
3楼2013-07-20 01:07:39
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)

引物三四十算啥。。    80+一样P
4楼2013-07-20 02:34:10
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