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huaruishi

新虫 (著名写手)

[交流] 标准曲线配制

请教大神，做标准曲线，可以把2倍的母液，用移液枪依次稀释吗？如果不能，究竟为什么?我最近做了4条标曲，都是r=1.0000,被老板骂说作假。个人认为，移液枪等倍稀释，误差小得多，为什么不行呢？难道四条标曲都是1.0000，只是偶然吗？
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1楼2013-07-08 17:57:26
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醉落尘凡

铁虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★
huaruishi(金币+1): 谢谢参与
huaruishi: 金币+2, 有帮助 2013-07-08 18:16:38
huaruishi: 金币+2 2013-07-09 20:30:21
做标准曲线还真没碰到过依次等倍稀释的。一般都是以母液分别吸取一定体积，配制成系列浓度标准溶液，然后制作标准曲线。实际上，楼主四条标准曲线R=1.0000还真不怪老板说作假。等倍稀释操作本身就会导致R=1.0000。
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2楼2013-07-08 18:09:57
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huaruishi

新虫 (著名写手)
那么那个r=1.0000是不是因为最大限度避免了误差才出现的呢？吸母液时用移液管和容量瓶会不会带来较大的误差？
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3楼2013-07-08 18:24:35
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醉落尘凡

铁虫 (初入文坛)
★ ★
huaruishi: 金币+2 2013-07-09 20:31:40
并不是因为避免了误差哦。而是等倍稀释会导致r=1.0000的出现。实际上移液误差可能比移液管的大，尤其是移液枪没校准的时候。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2013-07-09 00:55:25
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release53

至尊木虫 (文坛精英)
★ ★
huaruishi(金币+1): 谢谢参与
huaruishi: 金币+1 2013-07-09 20:31:57
制作标准曲线时溶液配制不是都要吧母液移取固定体积，然后配制成一系列浓度的标准液么？还可以用移液枪依次稀释的？
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5楼2013-07-09 11:16:57
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07sakura

新虫 (初入文坛)
★
huaruishi(金币+1): 谢谢参与
个人觉得问题在于你只吸取了一次，然后你的其他线性点都是依次在母液上面稀释出来的，那么你线性实际只是由一个点做出的理论延长，当你这个点发生偏差的时候，线性的R值实际上没有反应出来。
个人愚见，没学过统计学。。。
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huaruishi
6楼2013-07-09 14:41:12
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huaruishi

新虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 醉落尘凡 at 2013-07-08 18:09:57
做标准曲线还真没碰到过依次等倍稀释的。一般都是以母液分别吸取一定体积，配制成系列浓度标准溶液，然后制作标准曲线。实际上，楼主四条标准曲线R=1.0000还真不怪老板说作假。等倍稀释操作本身就会导致R=1.0000。

谢谢指点！
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7楼2013-07-09 20:31:07
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huaruishi

新虫 (著名写手)
送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by 07sakura at 2013-07-09 14:41:12
个人觉得问题在于你只吸取了一次，然后你的其他线性点都是依次在母液上面稀释出来的，那么你线性实际只是由一个点做出的理论延长，当你这个点发生偏差的时候，线性的R值实际上没有反应出来。
个人愚见，没学过统计 ...

大神高见！可惜没钱了。抱歉啊！
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8楼2013-07-09 20:33:14
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406119994

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by 醉落尘凡 at 2013-07-08 18:09:57
做标准曲线还真没碰到过依次等倍稀释的。一般都是以母液分别吸取一定体积，配制成系列浓度标准溶液，然后制作标准曲线。实际上，楼主四条标准曲线R=1.0000还真不怪老板说作假。等倍稀释操作本身就会导致R=1.0000。

是真的吗？我从学习配制标准溶液开始（跟一个博士师兄学的），就一直是等倍逐级稀释呢。这样做有什么不好吗？
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9楼2020-06-17 14:35:00
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jiazi45

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
其实这个问题还涉及到一个 有效数字的数学问题，以及实际操作的重现问题。

同样对于母液1.00 mg/mL来讲，按移液枪逐级等倍稀释得到的浓度点依次是0.500、0.250、0.125、0.0625、0.0312...（mg/mL），按移液管习惯操作得到的浓度点依次可能是0.500、0.200、0.100、0.0500、0.0200...（mg/mL）；如果你的母液浓度是1.07 mg/mL之类的数据，会发现前者稀释得到的浓度值处理会变成相当困难，而且对于一部分没有移液枪设备或使用习惯的同行来讲，不亚于一场灾难。

如果还要照顾到方法的定量限，你会发现母液配制都会变成一个难题，所以要养成自己的标液配制习惯，来匹配自己的检测方法、数据处理等方方面面。
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10楼2020-06-18 17:33:17
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