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金虫 (小有名气)

[求助] U251 细胞的MTT实验

U251细胞测定某药物的IC50。96孔板,接种一天后给药,2小时后,换培养基。换培养基的过程是用负压吸取培养液,加入PBS,再负压吸走,加入新培养基。问题是每次加入PBS再负压吸走后,中间的一大片细胞就没有了,基本只剩下边缘的一些细胞。感觉负压吸取的时候已经很小心了,不会碰到底部,但还是损失很多细胞。结果的误差就非常大。本来以为是PBS有问题,后来换用移液器慢慢吸取PBS,情况好一些,但是这个操作就很麻烦。是因为负压吸取的力量太大导致细胞脱落吗? 请大家指点,谢谢!
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lqw12406

木虫 (初入文坛)

楼主,您好,我前几个月从公司买了一株人脑胶质瘤U251细胞,当时接收的时候很好,就连续养了几代,冻存了2批,由于实验暂时没有开展,就把养着的细胞处理了,现在从液氮罐中复苏该细胞,都没有成活(2批都没有),打电话给公司说是冻存问题(我以前的细胞冻存都是按照4℃,-80℃,液氮),需要付钱再购买,但是不敢和老板讲,现在要做实验了心急如焚,看楼主养U251细胞,您好心能否赠送一株,或者交换也行,我这有Hep G2,Hep 3B,Smmc-7211,SW480,293T,A7r5,雪旺细胞等,非常感谢!!
2楼2014-05-16 14:10:29
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