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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » U251 细胞的MTT实验
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futurememory

金虫 (小有名气)

[求助] U251 细胞的MTT实验

U251细胞测定某药物的IC50。96孔板，接种一天后给药，2小时后，换培养基。换培养基的过程是用负压吸取培养液，加入PBS，再负压吸走，加入新培养基。问题是每次加入PBS再负压吸走后，中间的一大片细胞就没有了，基本只剩下边缘的一些细胞。感觉负压吸取的时候已经很小心了，不会碰到底部，但还是损失很多细胞。结果的误差就非常大。本来以为是PBS有问题，后来换用移液器慢慢吸取PBS，情况好一些，但是这个操作就很麻烦。是因为负压吸取的力量太大导致细胞脱落吗？ 请大家指点，谢谢！
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努力地生活着
1楼 2013-07-04 06:15:43
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lqw12406

木虫 (初入文坛)
楼主，您好，我前几个月从公司买了一株人脑胶质瘤U251细胞，当时接收的时候很好，就连续养了几代，冻存了2批，由于实验暂时没有开展，就把养着的细胞处理了，现在从液氮罐中复苏该细胞，都没有成活（2批都没有），打电话给公司说是冻存问题（我以前的细胞冻存都是按照4℃，-80℃，液氮），需要付钱再购买，但是不敢和老板讲，现在要做实验了心急如焚，看楼主养U251细胞，您好心能否赠送一株，或者交换也行，我这有Hep G2，Hep 3B，Smmc-7211，SW480，293T，A7r5，雪旺细胞等，非常感谢！！
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2楼2014-05-16 14:10:29
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