应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » 关于解淀粉芽孢杆菌基因敲除问题
71/1返回列表
查看: 1335  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

ctbctbctb

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于解淀粉芽孢杆菌基因敲除问题 已有2人参与

本人在做解淀粉芽孢杆菌的基因敲除,用的是热敏型质粒PVS7, 左右同源臂加起来大小为1400bp的片段, 将该片段和PVS7连接成重组质粒, 经酶切和电泳验证, 片段大小正确且只有1条带,但转化到解淀粉芽孢杆菌以后, 刚转化的重组菌做菌落PCR,发现有两条带,1条为目的片段1400bp,还有1条在1000bp左右; 而且重组菌传代后, 只有1000bp的一条带, 1400bp的带缺消失了. 用引物扩增原始菌和空质粒并没有1000bp的片段.
请问各位高手,究竟是什么原因呢?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-06-28 00:13:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lyl4840361

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

质粒图？你转化用的电转还是化学转化？
赞一下 回复此楼
2楼2015-01-14 11:04:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

why9639

木虫 (正式写手)

维斯特洛大陆守门员
请问你用的是什么转化方法啊？我也在做解淀粉芽孢杆菌的转化。一直没成功。谢谢！
赞一下 回复此楼
十有九人堪白眼，百无一用是书生
3楼2016-03-02 15:26:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天宇201266

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by why9639 at 2016-03-02 15:26:58
请问你用的是什么转化方法啊？我也在做解淀粉芽孢杆菌的转化。一直没成功。谢谢！

你好，请问你的解淀粉芽孢杆菌有转化出来吗？我最近也一直做这个转化一直没转化出来，有没有什么建议，谢谢？
赞一下 回复此楼
在路上。。。
4楼2018-07-06 09:31:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天宇201266

金虫 (正式写手)
你好，请问你的解淀粉芽孢杆菌有转化出来吗？我最近也一直做这个转化一直没转化出来，有没有什么建议，谢谢？
赞一下 回复此楼
在路上。。。
5楼2018-07-06 09:31:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

why9639

木虫 (正式写手)

维斯特洛大陆守门员
引用回帖:
4楼: Originally posted by 天宇201266 at 2018-07-06 09:31:38
你好，请问你的解淀粉芽孢杆菌有转化出来吗？我最近也一直做这个转化一直没转化出来，有没有什么建议，谢谢？...

参照地衣芽孢杆菌的转化方法，不过效率很低
赞一下(1人) 回复此楼
十有九人堪白眼，百无一用是书生
6楼2018-07-10 10:28:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小龙基因

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

内容已删除
赞一下 回复此楼
7楼2019-07-21 00:17:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ctbctbctb 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +3 熬夜的猫头鹰 2026-03-02 3/150 2026-03-02 11:45 by 刘兵
[考研] 276求调剂 +4 路lyh123 2026-02-28 5/250 2026-03-02 11:20 by yuchj
[考研] 295求调剂 +8 19171856320 2026-02-28 8/400 2026-03-02 11:19 by yuchj
[考研] 281求调剂 +5 2026计算机_诚心 2026-03-01 8/400 2026-03-02 11:05 by 汪！？！
[考研] 欢迎采矿、地质、岩土、计算机、人工智能等专业的同学报考 +5 pin8023 2026-02-28 7/350 2026-03-02 10:33 by ZY，先生
[考研] 材料学调剂 +10 提神豆沙包 2026-02-28 12/600 2026-03-02 09:26 by 李老师！
[考研] 江苏省农科院招调剂1名 +3 Qwertyuop 2026-03-01 3/150 2026-03-01 23:18 by aaadim
[硕博家园] 博士自荐 +7 科研狗111 2026-02-26 11/550 2026-03-01 22:24 by 哲平L
[考研] 299求调剂 +3 Y墨明棋妙Y 2026-02-28 5/250 2026-03-01 21:01 by tangxiaotian
[考研] 化工299分求调剂 一志愿985落榜 +5 嘻嘻(*^ω^*) 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:47 by 无际的草原
[考研] 0856化工专硕求调剂 +12 董boxing 2026-03-01 12/600 2026-03-01 19:45 by 材子momo
[考研] 328求调剂 +3 aaadim 2026-03-01 5/250 2026-03-01 17:29 by njzyff
[考研] 0856材料求调剂 +4 麻辣鱿鱼 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:51 by caszguilin
[考研] 285求调剂 +8 满头大汗的学生 2026-02-28 8/400 2026-03-01 16:47 by caszguilin
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-02-28 7/350 2026-03-01 15:14 by wjLi2017
[考研] 课题组接收材料类调剂研究生 +3 gaoxiaoniuma 2026-02-28 4/200 2026-03-01 14:30 by jjj三跨
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
[论文投稿] 求助coordination chemistry reviews 的写作模板 10+3 ljplijiapeng 2026-02-27 4/200 2026-03-01 09:07 by babero
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +8 吃宵夜1 2026-02-28 10/500 2026-02-28 20:27 by L135790
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭