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hraikeyan

金虫 (小有名气)

[求助] 冷冻干燥蛋白溶液后,活性改变

各位大侠,最近我在纯化一种蛋白。菌体在蛋白破碎后活性很高,而且在纯化后活性也很高。但是将纯化后的蛋白液冷冻干燥后活性不但降低,而且特异选择性也不好了(我的酶是用来拆分手性中间体的,本来只是对(+)的底物有作用,现在对(-)底物也有作用)。不知是什么原因造成的。冷冻干燥只是为了让蛋白进行浓缩,按说是不会对酶活性造成影响的。
各位大侠,如有什么好的建议,请多来指教。
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nothing isimpossible
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bleach060452

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
hraikeyan: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢,我试试加表面活性剂 2013-06-26 16:47:21
你也看到了,活性降低,特异性变化,只能是酶的结构变了~~

下次别冻干了,换别的方式浓缩试试
冷冻干燥蛋白溶液后,活性改变
3.png

岂能尽如人意,但求无愧我心
2楼2013-06-26 16:21:23
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bleach060452

新虫 (小有名气)

或者像上图中说的,加稳定剂
岂能尽如人意,但求无愧我心
3楼2013-06-26 16:22:14
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