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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 【求助/交流】怎样提活性污泥中细菌蛋白质
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vs570588

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】怎样提活性污泥中细菌蛋白质 已有4人参与

请各位大侠说说，要详细，我要用提取的蛋白质用考马斯亮蓝法定量，以此来表征细菌浓度变化。我买的是考马斯亮蓝定量试剂盒。但不知道怎样提细菌蛋白质？提出来后，样品怎样使用，和保存。另外，我比较熟悉用表面活性剂法提取DNA，不知道可不可以用提DNA的方法，把蛋白质提出来。
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1楼 2010-07-17 23:18:00
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vs570588

木虫 (正式写手)
只能顶下，看谁知道了
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2楼2010-07-18 14:21:20
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henkally

禁虫 (著名写手)
★ ★
vs570588(金币+1): 2010-07-20 22:08:01
lstt09nk(金币+2):欢迎多多交流~~ 2010-07-21 09:25:04
本帖内容被屏蔽
3楼2010-07-20 12:47:22
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vs570588

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by henkally at 2010-07-20 12:47:22:
首先，提蛋白质和提DNA肯定是不一样的~
参照你的实验，我建议的实验方案：
1，超声破碎活性污泥
2，离心分离污泥
3，上清液即为蛋白质溶液。
你所说的裂解液破碎提取蛋白质的方法，也是可行的。但是，裂解液 ...

谢谢你大答复，你的意思就是污泥取回来不用预处理直接就超声破碎吗？那我的污泥样品每次只能取5mL左右，这点够吗？
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4楼2010-07-20 22:09:51
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henkally

禁虫 (著名写手)
★ ★
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-07-21 04:41:40
本帖内容被屏蔽
5楼2010-07-20 22:19:01
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reasonspare

木虫 (著名写手)
★ ★
lstt09nk(金币+2):感谢交流~~ 2010-07-21 09:25:29
引用回帖:
Originally posted by vs570588 at 2010-07-17 23:18:00:
请各位大侠说说，要详细，我要用提取的蛋白质用考马斯亮蓝法定量，以此来表征细菌浓度变化。我买的是考马斯亮蓝定量试剂盒。但不知道怎样提细菌蛋白质？提出来后，样品怎样使用，和保存。另外，我比较熟悉用表面活 ...

你这想法很新颖，
用蛋白质表征细菌浓度，很不错。

但是有一个问题活性污泥里有没有真菌，或者放线菌。

大家给你的提蛋白方法，多是提水溶性蛋白，那些脂溶性或者醇溶性蛋白怎么办。
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大慈大悲观世音救苦救难观世音有求必应观世音普渡众生观世音千手千眼观世音官大敢管观世音无处不在观世音普观普长观世音南无观世音菩萨
6楼2010-07-21 04:47:02
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zhixuec

木虫 (著名写手)
★
reasonspare(金币+1):谢谢分享。 2010-07-22 07:03:21
引用回帖:
Originally posted by reasonspare at 2010-07-21 04:47:02:



你这想法很新颖，
用蛋白质表征细菌浓度，很不错。

但是有一个问题活性污泥里有没有真菌，或者放线菌。

大家给你的提蛋白方法，多是提水溶性蛋白，那些脂溶性或者醇溶性蛋白怎么办。

楼上所说也是我想问的，你那脂溶性或者醇溶性蛋白要怎么处理？？？？
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酷爱の族
7楼2010-07-21 09:35:01
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vs570588

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by reasonspare at 2010-07-21 04:47:02:



你这想法很新颖，
用蛋白质表征细菌浓度，很不错。

但是有一个问题活性污泥里有没有真菌，或者放线菌。

大家给你的提蛋白方法，多是提水溶性蛋白，那些脂溶性或者醇溶性蛋白怎么办。

活性污泥主要是是由菌胶团组成。这种方法看英文文献上，有这样做的。但很多都是提EPS中的蛋白质，来分析活性污泥的各种性能。也有通过提活性污泥的总蛋白来看微生物的浓度。但后者的具体怎样提还是不知道。
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8楼2010-07-21 22:48:28
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