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vs570588

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】怎样提活性污泥中细菌蛋白质 已有4人参与

请各位大侠说说,要详细,我要用提取的蛋白质用考马斯亮蓝法定量,以此来表征细菌浓度变化。我买的是考马斯亮蓝定量试剂盒。但不知道怎样提细菌蛋白质?提出来后,样品怎样使用,和保存。另外,我比较熟悉用表面活性剂法提取DNA,不知道可不可以用提DNA的方法,把蛋白质提出来。
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vs570588

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by reasonspare at 2010-07-21 04:47:02:



你这想法很新颖,
用蛋白质表征细菌浓度,很不错。

但是有一个问题活性污泥里有没有真菌,或者放线菌。

大家给你的提蛋白方法,多是提水溶性蛋白,那些脂溶性或者醇溶性蛋白怎么办。

活性污泥主要是是由菌胶团组成。这种方法看英文文献上,有这样做的。但很多都是提EPS中的蛋白质,来分析活性污泥的各种性能。也有通过提活性污泥的总蛋白来看微生物的浓度。但后者的具体怎样提还是不知道。
8楼2010-07-21 22:48:28
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vs570588

木虫 (正式写手)

只能顶下,看谁知道了
2楼2010-07-18 14:21:20
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henkally

禁虫 (著名写手)

★ ★
vs570588(金币+1): 2010-07-20 22:08:01
lstt09nk(金币+2):欢迎多多交流~~ 2010-07-21 09:25:04
本帖内容被屏蔽

3楼2010-07-20 12:47:22
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vs570588

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by henkally at 2010-07-20 12:47:22:
首先,提蛋白质和提DNA肯定是不一样的~
参照你的实验,我建议的实验方案:
1,超声破碎活性污泥
2,离心分离污泥
3,上清液即为蛋白质溶液。
你所说的裂解液破碎提取蛋白质的方法,也是可行的。但是,裂解液 ...

谢谢你大答复,你的意思就是污泥取回来不用预处理直接就超声破碎吗?那我的污泥样品每次只能取5mL左右,这点够吗?
4楼2010-07-20 22:09:51
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