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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » real-timePCR 相对表达量计算的问题
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foreverlukel

新虫 (初入文坛)

[求助] real-timePCR 相对表达量计算的问题

各位大虾，我做的real-timePCR中，两个目的基因的扩增效率分别为103%、109%，内参基因的扩增效率为111%。我知道△△Ct法可以计算表达量，但是用这个方法的前提是扩增效率全都相等，我不想再做了，请有什么办法能校正么？或者有什么其他的方法计算相对表达量么？谢谢啦
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1楼2013-06-21 10:26:27
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lj152321

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
foreverlukel: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 谢谢您！ 2013-06-24 11:18:32
扩增效率在90%-110%都是符合要求的，说明引物扩增效率良好。。扩增效率全都相等，在现实中是达不到的。。你这几个数据可以了。。
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2楼2013-06-22 17:19:01
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zhou阳阳

新虫 (初入文坛)
你的数据已经很接近了，内参基因的扩增效率为111%不在范围内，稍微修改一下退火温度试试。
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3楼2016-01-27 15:27:11
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aassbw

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
1楼: Originally posted by foreverlukel at 2013-06-21 10:26:27
各位大虾，我做的real-timePCR中，两个目的基因的扩增效率分别为103%、109%，内参基因的扩增效率为111%。我知道△△Ct法可以计算表达量，但是用这个方法的前提是扩增效率全都相等，我不想再做了，请有什么办法能校正 ...

麻烦问下你的扩增效率是怎么得知的

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4楼2017-04-19 22:19:30
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