24小时热门版块排行榜

返回列表

wodechouyu

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 1
帖子: 2
在线: 1.2小时
虫号: 2148328
注册: 2012-11-26

[求助] 关于体外转录的模板问题！急！

我最近在做体外转录，用的是Promega的 T7 RiboMAX Express Large Scale RNA Production System Protocol。线性化的质粒体外转录后只用Dnase处理，并没有再做纯化，直接冻存-70。以Nuclease-Free Water做Blank用NanoDrop2000测得RNA浓度为14015.9ng/μl，260/280是1.86,260/230是2.17。这个浓度是不是高得不正常啊？为什么会这么高呢?

还有，我在20μf反应l体系中加了2μl该RNA，进行探针法一步法RT-PCR，所做的不加反转录酶混合物的对照也在25个循环后出现了扩增曲线，这是不是说明我的RNA模板中还含有残余DNA呢？我如果要用体外转录的RNA做标准品的话，是不是必须不能含有一丁点DNA呢？

回复此楼

» 猜你喜欢

莫那利珠单抗阻断NKG2A/HLA-E抑制通路 | Biochempartner 已经有0人回复
GSPT1口服分子胶降解剂MRT-2359 | Biochempartner 已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有162人回复
碳青霉烯类抗生素为何需联用西司他丁钠？ | Biochempartner 已经有0人回复
源自蕨类植物的抗炎美白活性分子去甲氧基荚果蕨素 | Biochempartner 已经有0人回复
肠道里的"代谢开关"：Fexaramine用肠道限制性重新定义 FXR 激动剂已经有0人回复
DMXAA：从血管破坏剂到STING通路研究的关键工具分子 | Biochempartner 已经有0人回复
靶向PD-L1的人源化单克隆抗体阿特珠单抗已经有0人回复
"探针之父"(+)-JQ-1如何改变表观遗传研究 | Biochempartner 已经有0人回复
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松已经有0人回复
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析已经有0人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

使用多对引物进行实时定量PCR后未得到实验结果，是否能说明目的基因不表达？已经有10人回复
UTR区域的遗传来源已经有3人回复
反转录后用cDNA做模板扩不出目的基因怎么办？？？已经有6人回复
QPCR模板RNA逆转录为CDNA后，CT值过大已经有7人回复
实时定量模板统一量是提材料 or RNA初始量 or 反转录后的cDNA量一样？已经有6人回复
构质粒P基因全长的时候用逆转录的模板P不出来，可以提DNA来P吗？？已经有5人回复
RT-PCR逆转录加模板问题已经有9人回复
模板浓度高会影响反转录结果吗? 已经有4人回复
【求助/交流】体外转录11kb的片段用哪个公司的试剂比较好？已经有11人回复
【求助/交流】关于体外转录的模板已经有8人回复
【求助/交流】关于PCR的问题已经有18人回复

1楼 2013-06-17 21:21:05

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

wodechouyu

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 1
帖子: 2
在线: 1.2小时
虫号: 2148328
注册: 2012-11-26

有人知道么？

回复此楼

2楼2013-07-15 15:59:31

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

相关版块跳转我要订阅楼主 wodechouyu 的主题更新

返回列表