24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1361  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

小李爱学习

银虫 (正式写手)

[求助] 如何富集沉淀植物(草莓)中的蛋白质? 已有1人参与

小弟我最近要分离纯化草莓果实中的一种水溶性的酶,做预实验的时候用缓冲液与草莓共同打浆破碎,离心取上清液后用硫酸铵沉淀上清液中的蛋白。可能是草莓中蛋白含量很低,所以沉淀效果不好,即使硫酸铵饱和度达到100%,也只能得到很少的沉淀,回收率不到15%。之前也做过分级沉淀,饱和度在60%之前根本没有沉淀,超过60%后沉淀慢慢析出,但量非常少,60-80%、80-100%各组分都有酶的活性。
请教各位有什么方法能够在不引起酶变性的情况下,有效富集沉淀我所需要的酶呢?谢谢!

[ Last edited by 小李爱学习 on 2013-6-8 at 20:28 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
小李爱学习: 金币+3, 有帮助 2013-06-09 18:04:05
wizardfan: 金币+2, 谢谢补充 2013-06-10 03:58:06
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小李爱学习 at 2013-06-09 17:53:41
对! 草莓中蛋白含量很低,其他处理之前需要富集。草莓中可溶性固形物含量很好,无法进行超滤浓缩。...

可以先用过滤方法除去固体颗粒,再做超滤。分级离心也可以除去很多不溶性颗粒。沉淀也可以用聚乙二醇或者丙酮、凝集素、碱性蛋白质等其他有机试剂,不一定非用硫酸铵。
4楼2013-06-09 17:58:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-06-10 03:57:52
你一定要用沉淀方法富集该蛋白质?沉淀方法是很粗糙的分离方法,你可用离子交换层析、分子筛层析和亲和层析方法。即使要用沉淀方法,在粗处理时分级分离和超滤浓缩也可以去掉很多的非蛋白质杂质。
2楼2013-06-09 17:43:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小李爱学习

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 凌波丽 at 2013-06-09 17:43:24
你一定要用沉淀方法富集该蛋白质?沉淀方法是很粗糙的分离方法,你可用离子交换层析、分子筛层析和亲和层析方法。即使要用沉淀方法,在粗处理时分级分离和超滤浓缩也可以去掉很多的非蛋白质杂质。

对! 草莓中蛋白含量很低,其他处理之前需要富集。草莓中可溶性固形物含量很好,无法进行超滤浓缩。
3楼2013-06-09 17:53:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小李爱学习

银虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 凌波丽 at 2013-06-09 17:58:21
可以先用过滤方法除去固体颗粒,再做超滤。分级离心也可以除去很多不溶性颗粒。沉淀也可以用聚乙二醇或者丙酮、凝集素、碱性蛋白质等其他有机试剂,不一定非用硫酸铵。...

嗯 好 我按照你的方法试试 先过滤 再超滤浓缩试试。
5楼2013-06-09 18:03:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 282求调剂 +20 ycy1201 2026-04-01 22/1100 2026-04-04 00:42 by userper
[考研] 268求调剂 +7 你好tg 2026-04-03 8/400 2026-04-03 23:43 by wwytracy
[考研] 学硕288调剂!!! +3 小王xw123 2026-04-03 3/150 2026-04-03 21:20 by 啵啵啵0119
[考研] 327求调剂 +9 小卡不卡. 2026-03-29 9/450 2026-04-03 19:48 by 百灵童888
[考研] 求调剂机会 +5 意染ivy 2026-04-03 5/250 2026-04-03 15:13 by qoooooo614
[考研] 085600,材料与化工321分求调剂 +12 大馋小子 2026-03-28 12/600 2026-04-03 14:16 by 百灵童888
[考研] 一志愿华北电力大学(北京),材料科学与工程学硕265,求调剂 +9 yelck 2026-04-03 10/500 2026-04-03 13:20 by yelck
[考研] 266分,一志愿电气工程,本科材料,求材料专业调剂 +9 哇呼哼呼哼 2026-04-02 9/450 2026-04-03 12:05 by 1753564080
[考研] 求调剂 +3 晟功? 2026-04-03 3/150 2026-04-03 11:52 by wxiongid
[考研] 296材料专硕求调剂 +20 202451007219 2026-04-02 21/1050 2026-04-03 11:15 by wangjy2002
[考研] 材料与化工306分找调剂 +10 沧海轻舟e 2026-04-03 11/550 2026-04-03 11:07 by 啵啵啵0119
[考研] 262求调剂 +6 励志一定发文章 2026-04-02 7/350 2026-04-03 09:54 by linyelide
[论文投稿] chinese chemical letters英文版投稿求助 120+4 Yishengeryi 2026-03-30 6/300 2026-04-02 17:19 by Yishengeryi
[考研] 26考研调剂 +4 Wnz.20030617 2026-04-01 5/250 2026-04-02 16:11 by 1939136013狗壮
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358 +8 cs0106 2026-04-01 9/450 2026-04-02 10:36 by 不吃魚的貓
[考研] 377求调剂 +3 RASKIN 2026-04-02 3/150 2026-04-02 09:45 by zzchen2000
[考研] 11408 321分求调剂 +3 huchun12138 2026-03-30 4/200 2026-04-01 22:48 by guanxin1001
[考研] 070300化学279求调剂 +15 哈哈哈^_^ 2026-03-31 17/850 2026-04-01 21:37 by 给你你注意休息
[考研] 一志愿华东师范大学有机化学专业,初试351分,复试被刷求调剂! +9 真名有冰 2026-03-29 10/500 2026-03-31 18:01 by xhai2011
[考研] 一志愿西电085401数一英一299求调剂 六级521 +4 爱吃大鸭梨 2026-03-31 4/200 2026-03-31 11:51 by 搏击518
信息提示
请填处理意见