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求助~有关 生物材料的 细胞毒性试验的问题。
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我现在制备了一种组织工程的支架材料。（薄膜片状） 现在到了做细胞实验的环节。以前也没做过。 主要是做材料的细胞毒性试验。就是做MTT实验。 我想请教下下面的问题： 1.我已制备的薄膜片状材料应该怎么消毒？ 2.做细胞毒性实验的时候是该用直接接触实验呢，还是浸提液实验呢？ 3.细胞打算用BMSC，可以用直接接触实验把材料与细胞共培养做细胞毒性实验吗？ |
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5楼2013-06-05 10:24:37
yingxiongz
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有国标的，医疗器械生物学评价第5部分：体外细胞毒性试验，可参考。 灭菌一般高压灭菌吧； 直接接触法和浸提液法，都可以，个人感觉浸提液法方便点。直接接触法要根据细胞培养板剪裁材料，最多只能用24孔板，96孔板那孔就太小了，阳性对照的PVC膜片做着也不太好做吧。 Electrospinning of carboxymethyl chitin/poly(vinyl alcohol) nanofibrous scaffolds for tissue engineering applications这篇文献中有MTT assay，就是最后不是用的DMSO，你可以再找找别的文献看。 |
4楼2013-06-04 18:46:17
tmiao
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1.我已制备的薄膜片状材料应该怎么消毒？ 75%乙醇清洗几次，然后无菌PBS清洗几次，然后又用培养基润洗，后几次都在无菌环境下进行 2.做细胞毒性实验的时候是该用直接接触实验呢，还是浸提液实验呢？ 细胞和支架培养过夜，然后根据MTT的protocol进行，测absorbance的时候取出支架 3.细胞打算用BMSC，可以用直接接触实验把材料与细胞共培养做细胞毒性实验吗？ 可以，我就是这么做的 |
6楼2013-06-05 18:38:41
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