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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 生物医学基础 » 求助~有关 生物材料的 细胞毒性试验的问题。
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如萤映雪

金虫 (小有名气)

[求助] 求助~有关 生物材料的 细胞毒性试验的问题。

我现在制备了一种组织工程的支架材料。（薄膜片状）
现在到了做细胞实验的环节。以前也没做过。
主要是做材料的细胞毒性试验。就是做MTT实验。
我想请教下下面的问题：
1.我已制备的薄膜片状材料应该怎么消毒？
2.做细胞毒性实验的时候是该用直接接触实验呢，还是浸提液实验呢？
3.细胞打算用BMSC，可以用直接接触实验把材料与细胞共培养做细胞毒性实验吗？
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还有很多事情要做~
1楼 2013-06-04 11:10:17
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爱狗的猫猫

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 清风小李子 at 2013-06-05 10:24:37
（1）消毒问题：通常是这样的：纯乙醇浸泡过夜，75%乙醇浸泡几个小时，紫外消毒过夜，然后培养基预培养过夜；
（2）如果你要做材料的生物相容性平价，应该直接接触实验。浸提液一般测其降解液对细胞的影响。
（3） ...

MTT怎么做呢，把每组细胞全都消化下来然后铺板吗？？是不是不用记数了全部铺上去，等黏附了加MTT呢？？还是直接加MTT就行呢
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9楼2014-03-12 20:55:39
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yingxiongz

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
红舟流星: 金币+1, 欢迎来生物材料板块应助交流 2013-06-04 23:35:39
这个要看类似的文献报道，不同的细胞，不同的培养条件都不是完全相同。要看你的体系，最好引用高影响因子的类似文章，到时把他们做的试样支架换成你们的就可以。非生物专业比较难操作，我们是跟生院合作，交钱让他们培养，我们看文献提出相关方案，具体操作时他们做的
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镁合金生物材料
2楼2013-06-04 11:35:48
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Jackcd12

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
红舟流星: 金币+1, 欢迎来生物材料板块应助交流 2013-06-04 23:35:44
对固体支架材料的细胞相容性和毒性试验一般都采用MTT试验，在高压釜中灭菌；将你的bMSCs直接接种到材料表面，要注意的是你的样品原片尺寸最好与培养板孔的内径相当，以免在接种和培养过程中很多细胞转移到培养板底部去了。
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Themoreamanlearns,themoreheknowshisignorance!
3楼2013-06-04 11:48:41
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longlotian

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
红舟流星: 金币+1, 欢迎来生物材料板块应助交流 2013-06-04 23:35:50
有国标的，医疗器械生物学评价第5部分：体外细胞毒性试验，可参考。
灭菌一般高压灭菌吧；
直接接触法和浸提液法，都可以，个人感觉浸提液法方便点。直接接触法要根据细胞培养板剪裁材料，最多只能用24孔板，96孔板那孔就太小了，阳性对照的PVC膜片做着也不太好做吧。
Electrospinning of carboxymethyl chitin/poly(vinyl alcohol) nanofibrous scaffolds for tissue engineering applications这篇文献中有MTT assay，就是最后不是用的DMSO，你可以再找找别的文献看。
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4楼2013-06-04 18:46:17
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