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永远不知道

至尊木虫 (著名写手)

金花家族创始人

[求助] 蛋白质印迹的抗体选择

有谁能给我解释一下,目的蛋白的抗体选择?
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xiaoyu927

禁虫 (文坛精英)

本帖内容被屏蔽

2楼2013-05-16 22:03:33
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michaelwuqingyu

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
要看你的目的蛋白是什么了, 以及你的物种。有些是要找公司合成的。
3楼2013-05-17 05:42:31
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梁以薰

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
隔行如隔山啊~~~不懂
如人饮水,冷暖自知
4楼2013-05-17 08:29:41
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梁以薰

木虫 (著名写手)

点错了,应该是不应助的~~~帮顶吧
如人饮水,冷暖自知
5楼2013-05-17 08:30:17
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xulinan

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-05-18 15:57:36
一般都是直接找公司买的,但是除非你的蛋白用的很普遍,否则价格不菲啊。
如果你做wb的话可以用兔子通过免疫得抗体,这种抗体纯度低,但是可以,我们实验室做过,将纯的目的蛋白给兔子分期注册免疫就好,然后取血清,建议女童鞋慎重,活兔取血啊...
如果目的蛋白被修饰过,比如加过GFP,那么直接买GFP抗体比较划算,GFP抗体生产量大,价格也便宜些。
前几天一个虫友说一个蛋白的抗体其实有多种,就是结合位点不一样,如果你的目的和相互作用研究相关,那么选哪种就看你具体目的了,避开序列和空间结构上有影响的抗体比较合适。
6楼2013-05-17 08:59:31
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-05-18 15:57:47
分为一抗和二抗,都是可以买到的。首先知道你的蛋白,再去买一抗和二抗,一抗是结合在你的目的蛋白上的,二抗是和一抗结合在显色试剂作用下显色的。
好吧,我就知道这么多了。
7楼2013-05-17 10:14:11
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ZRFZYY

银虫 (正式写手)

你表达目的蛋白所用的载体是有标签的吧,一抗就选带标签的抗体,二抗就是相应的抗抗体啊
用心做事
8楼2013-05-17 10:15:14
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ericyo918

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你可以自己做,也可以找公司做,你这个说得有点宽泛,可以再细致一点
9楼2013-05-17 10:26:08
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丿花落丶小兔

铁杆木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-05-18 15:57:56
抗体指机体的免疫系统在抗原刺激下,由B淋巴细胞分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白。载体,你说的是那种载体?生命科学载体有2种,一种是分布于膜上的载体蛋白,和物质运输有关。另一种是基因工程里面的携带外源DNA的一段DNA片段,例如质粒、噬菌体和动植物病毒。所以,抗体全部是蛋白质,载体部分是蛋白质。
按抗体的来源,可将其分为天然抗体和免疫抗体。
抗体就是免疫球蛋白,是改变了的球蛋白分子。由特异性抗原刺激产生,抗体的产生是由于抗原侵入人体后引起各种免疫细胞相互作用,使B使淋巴分化增殖而形成浆细胞,浆细胞可产生分泌抗体。
http://baike.baidu.com/view/66869.html?wtp=tt#8
初学者请多关照~
10楼2013-05-17 17:16:22
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