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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 请教GPC标准品的购买及标准曲线制作
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zjxhigh258

金虫 (正式写手)

[求助] 请教GPC标准品的购买及标准曲线制作 已有1人参与

我想用GPC测腐殖酸的分子量分布。第一次用这个方法，柱子选的的差不多了
，柱子是10000以下的。现在要买聚乙二醇的标准品。我的问题是：

1标准品的浓度配到多少？进样量是多少？这个和买的标准品量有关

2 是买不同分子量的单标好还是买套装的试剂盒？还是买各厂家的试剂盒？常用的是哪种？

3 有哪位前辈用过安捷伦的预称量试剂盒？我咨询了他说是配好的直接进样就行，包装是2ml，不知样有多少？能做几次？

因为是第一次做这个，以前也没有用液相的经验，现在是一头雾水，求助各位，谢谢
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1楼 2013-05-07 15:57:09
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Archimedes

铁杆木虫 (著名写手)

米德牛

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zjxhigh258: 金币+2 2013-05-08 09:49:16
第一个问题：标样浓度不需配的太高，因为标样很贵，节省点用，一般浓度为2~5mg/mL
第二个问题：我认为买不同分子量的单标比较好，这样可以长期使用。我们实验室用的是PL的（现在已被Agilent收购），有10个标样，每个标样的量有0.5g。
第三个问题：这种预称量试剂盒应该没有单独买标样的划算。因为仪器的寿命一般是10年以上，GPC一般一个季度就要进行一次校正，所以这个寿命期限内要进行很多次校正，这样算来需要的标样量也不少。故还是买单标划算。
以上意见仅供参考，希望对你有所帮助。
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未来的种子深埋在过去
2楼2013-05-07 21:50:24
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Archimedes

铁杆木虫 (著名写手)

米德牛
另外，购买标样的时候需要与供应商沟通好，告知你所用GPC柱的分子量范围，方便选择合适分子量的标样及个数。一般标样点不低于5个，推荐做10个点。
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未来的种子深埋在过去
3楼2013-05-07 21:52:03
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zjxhigh258

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Archimedes at 2013-05-07 21:50:24
第一个问题：标样浓度不需配的太高，因为标样很贵，节省点用，一般浓度为2~5mg/mL
第二个问题：我认为买不同分子量的单标比较好，这样可以长期使用。我们实验室用的是PL的（现在已被Agilent收购），有10个标样，每 ...

谢谢你
再咨询一下，我看安捷伦的单标样本上给的Mw/Mn都很小，还有一个美国聚合物的APSC的就比较大，这个是否有影响。
我买的柱子排阻界限小于10000的，也最好用10个点吗？
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4楼2013-05-08 09:48:22
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Archimedes

铁杆木虫 (著名写手)

米德牛
★ ★
crity328: 金币+2, 感谢交流，欢迎常来~ 2013-05-08 18:37:40
引用回帖:
4楼: Originally posted by zjxhigh258 at 2013-05-08 09:48:22
谢谢你
再咨询一下，我看安捷伦的单标样本上给的Mw/Mn都很小，还有一个美国聚合物的APSC的就比较大，这个是否有影响。
我买的柱子排阻界限小于10000的，也最好用10个点吗？...

看你自己的选择了，Mw/Mn值（PD值）越小越精确，但一般价格也越高。如果你要求高精度的结果，那就选Agilent，不高则选后者。APSC的PD值多大？一般不要超过1.1.你的色谱柱排除极限小于10000，那确实是高精度的一根柱子，建议在资金允许的情况下买Agilent的，这样才能与这根柱子的精度相配。至于点的个数，点数做的多的应该更准确，但买标准品的花费也越多，可以适当少几个点。而且这么窄的范围标样不好找吧，咨询一下安捷伦。
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zjxhigh258
未来的种子深埋在过去
5楼2013-05-08 17:09:24
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zjxhigh258

金虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by Archimedes at 2013-05-08 17:09:24
看你自己的选择了，Mw/Mn值（PD值）越小越精确，但一般价格也越高。如果你要求高精度的结果，那就选Agilent，不高则选后者。APSC的PD值多大？一般不要超过1.1.你的色谱柱排除极限小于10000，那确实是高精度的一根柱 ...

谢谢啦
安捷伦我咨询过了，在样本上看的他家的10000以下单标的PD值在1.04~1.08左右。第一次用液相，还有很多不明白的呢~
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6楼2013-05-09 14:07:29
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zhiyao2034

铁虫 (小有名气)
楼主是否已经成功做好标曲。。并且测好分子量，。新手现在也是一头雾水，。望分享经验
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7楼2015-03-12 21:03:30
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chen01

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

1.浓度大约是2~5mg/ml，进样量仪器本身就已经设置好的，不需要担心，只是进样的时候小心不能把气泡打进去就行。这个跟买的标准品量无关
2.买单标的好，因为一般很多时候会根据我们样品的分子量选择进的表样来判断仪器的稳定性，所以买单标的会比较好。
3.没使用过，但是一般情况下，配好的才2ml，太少了，要是按照正规使用，估计不用一个月就需要再次购买了。
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8楼2015-03-13 14:20:45
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