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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » 葡聚糖凝胶G25制作标准曲线
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xitu426

新虫 (初入文坛)

[求助] 葡聚糖凝胶G25制作标准曲线

我选用溶菌酶、氧化型谷胱甘肽（分子量602）和还原型谷胱甘肽（分子量307）作为标准品过凝胶G25，每种都称50mg,一起溶于5ml蒸馏水中，相当于浓度为10mg/ml,然后用蒸馏水做洗脱剂，溶菌酶很快洗脱出来，但是氧化型谷胱甘肽和还原型的都600多毫升了，还没出来，怎么回事啊？急急急！！！！我用的柱子是1.6*100的。高手救命啊！！！！！
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1楼2012-09-21 10:28:40
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396101466

金虫 (正式写手)

一段遗失的美好

【答案】应助回帖

树树8013: 应助指数+1, 谢谢对虫友的提示，请继续关注本帖。 2012-09-23 10:18:48
我不太确定你要这样做的目的是什么？用这种方法得到的是标准曲线？是什么的标准曲线？好像过凝胶柱没有这种说法吧？我做的这么久都没有这样做过！再者，用谷胱甘肽这样的小分子和溶菌酶这样的蛋白大分子在一起做分离纯化有意义么？
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人生的三大悲剧：不知道选择，不坚持选择，不断选择！
2楼2012-09-21 12:50:59
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ZUSTleeds

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
同意2楼，楼主样品选择不当。
样品分子量在柱子分离范围内才有意义。
谷胱甘肽小于G25最低分子量，没有意义的。
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3楼2012-09-22 00:23:40
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xitu426

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 396101466 at 2012-09-21 12:50:59
我不太确定你要这样做的目的是什么？用这种方法得到的是标准曲线？是什么的标准曲线？好像过凝胶柱没有这种说法吧？我做的这么久都没有这样做过！再者，用谷胱甘肽这样的小分子和溶菌酶这样的蛋白大分子在一起做分离 ...

用标准品做出标准曲线后，走自己的样品，对照一下就知道自己样品的分子量范围了啊，我看好多文献都这么做的啊
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4楼2012-09-23 18:56:09
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xitu426

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ZUSTleeds at 2012-09-22 00:23:40
同意2楼，楼主样品选择不当。
样品分子量在柱子分离范围内才有意义。
谷胱甘肽小于G25最低分子量，没有意义的。

我看文献都这么做的 我就这么做了 呜呜
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5楼2012-09-23 18:57:25
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396101466

金虫 (正式写手)

一段遗失的美好
引用回帖:
4楼: Originally posted by xitu426 at 2012-09-23 18:56:09
用标准品做出标准曲线后，走自己的样品，对照一下就知道自己样品的分子量范围了啊，我看好多文献都这么做的啊...

我倒是没有看到过这样的？难道你的物质不能通过其他方法检测分子量大小么？再说G25的分离范围好像是75-1K的分子，你用小分子是没有分离效果的！
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人生的三大悲剧：不知道选择，不坚持选择，不断选择！
6楼2012-09-23 20:22:47
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