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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求解读此PCR 为何如此不堪入目
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渭水凡夫

铁虫 (小有名气)

[求助] 求解读此PCR 为何如此不堪入目

为什么会跑成这样啊  sample 是血浆和血清DNA  用MIX 做的PCR

2013-5-5晚PCR1.JPG



2013-5-5晚PCR2.JPG



2013-5-5晚PCR3.JPG
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1楼 2013-05-06 17:54:16
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reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
特异性不高，建议增加退火温度，适当缩短延伸时间，可以增加引物GC含量值。

你的Marker是多大的，对于你的产物是不是不太合适。

模版最好定量。
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9楼2013-05-08 15:25:53
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的marker为什么这么暗？我觉得可能是PCR的模板量太多。
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2楼2013-05-07 02:56:03
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genolab

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
DNA质量如何？
引物是不是不太好？自己设计的还是文献中的？
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3楼2013-05-07 09:24:23
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渭水凡夫

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-05-07 02:56:03
你的marker为什么这么暗？我觉得可能是PCR的模板量太多。

因为是血浆中提的DNA 量很少 加了5ul
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平静的水和不叫的狗是最可怕的
4楼2013-05-07 19:19:39
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