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关于离子交换再生的问题!!疑惑啊!! 已有3人参与
DEAE Sepharose FF用了很久了,但有个问题一直想不明白。
我是用来分离蛋白质的,通常缓冲液pH8.5-9.0,让蛋白质带负电,结合后用NaCl洗脱,之后是再生,通常用高浓度的NaCl或低浓度的NaOH洗脱。
问题是:用NaCl或NaOH再生时,Cl-t和OH-离子已经和交换基团结合满了,再上样蛋白质时怎么又能和蛋白质结合呢?可能是蛋白质结合能力强吧。如果是蛋白质结合能力强,那怎么又能用NaCl或NaOH洗脱下来呢?
疑惑啊!! |
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