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fxj1986

木虫 (正式写手)

从小就是好人

[求助] 电击转化技术

最近做电转,将近一个星期了,总转不进去,不知道原因何在。电转本来效率不高,但是以前做,虽然每次长出来的单克隆不多,但是总的来说效果还不错。
我现在的宿主菌是肺炎克雷伯氏菌(革兰氏阴性),本身含一重组载体(pBAD33,氯霉素抗性,连了3个外源基因约6.5k),现在要转进去另外一个重组载体(pBAD18,卡那霉素抗性,连了2个外源基因约3k),电转时pulse时间在4ms-5ms之间。
求分析,求建议。
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自助者天助!
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-04-29 15:04:51
两个质粒的复制子是相同的还是不同的?相同的话会不相容。

那只有再试试了。
5楼2013-04-30 11:06:57
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j2

木虫 (正式写手)

意思是要同时存在2种质粒
修炼ing,当虫仙……
2楼2013-04-29 10:51:50
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fxj1986

木虫 (正式写手)

从小就是好人

引用回帖:
2楼: Originally posted by j2 at 2013-04-29 10:51:50
意思是要同时存在2种质粒

是,前一个质粒也是电转进去的····
自助者天助!
3楼2013-04-29 12:59:29
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
fxj1986: 金币+1, 有帮助, 复制子不一样的 2013-04-29 18:46:15
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励交流! 2013-05-01 22:01:11
两个质粒的复制子是相同的还是不同的?相同的话会不相容。
4楼2013-04-29 15:04:51
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