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waters C18柱子压力上升降不下来
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蛋白样品400ul+400ulHFIP+200ul甲酸溶解后离心上样,bufferA为100%水+0.1%TFA,bufferB为100%乙腈+0.1TFA,上样三四次后,柱子压力逐步升高,我用的是waters的C18柱子,用水—异丙醇-甲醇-水,梯度冲洗,bufferA为100%水+0.1%TFA,bufferB为100%乙腈+0.1TFA,梯度冲洗,压力都没有降下来,怎么办能使压力不上升呢?不接柱子压力很小,应该就是柱子的原因 |
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