应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » waters C18柱子压力上升降不下来
101/1返回列表
查看: 2434  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

liyan20220

木虫 (著名写手)

[求助] waters C18柱子压力上升降不下来

蛋白样品400ul+400ulHFIP+200ul甲酸溶解后离心上样，bufferA为100%水+0.1%TFA，bufferB为100%乙腈+0.1TFA，上样三四次后，柱子压力逐步升高，我用的是waters的C18柱子，用水—异丙醇-甲醇-水，梯度冲洗，bufferA为100%水+0.1%TFA，bufferB为100%乙腈+0.1TFA，梯度冲洗，压力都没有降下来，怎么办能使压力不上升呢？不接柱子压力很小，应该就是柱子的原因
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-04-11 21:08:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kkbyb

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
反冲，正着冲越冲越不好处理
赞一下 回复此楼
2楼2013-04-11 23:27:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

akosrios

铁杆木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
做蛋白最好用保护柱，应该是筛板有些堵，去下超声一下
赞一下 回复此楼
中华人民共和国公民有言论、出版、集会、结社、游行、示威的自由。---中国人民共和国宪法二章三十五条
3楼2013-04-12 08:06:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

swallow13

禁虫 (正式写手)
★
感谢参与，应助指数 +1
crity328: 金币+1, 感谢应助，欢迎常来！ 2013-04-12 14:35:30
本帖内容被屏蔽
4楼2013-04-12 10:55:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liu2011

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
4楼: Originally posted by swallow13 at 2013-04-12 10:55:39
不同意一楼的观点 反冲绝对不是首选的方法 建议选择更强的溶剂 如DMSO或者DMF来冲洗 另外 之前有位坛友也遇到过蛋白堵柱子的问题 他是用蛋白酶来冲洗柱子 压力降下来了 供lz参考

蛋白酶是冲洗蛋白样品堵塞的好办法
赞一下 回复此楼
5楼2013-04-12 14:27:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyan20220

木虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by liu2011 at 2013-04-12 14:27:56
蛋白酶是冲洗蛋白样品堵塞的好办法...

用什么蛋白酶啊，我的融合蛋白是MBP。担心是融合蛋白没有洗下来
赞一下 回复此楼
6楼2013-04-16 22:08:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

swt1898

铁虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

这样要加强样品的前处理，不然柱子费的快，银子花花的
赞一下 回复此楼
7楼2013-04-17 09:39:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liu2011

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by liyan20220 at 2013-04-16 22:08:17
用什么蛋白酶啊，我的融合蛋白是MBP。担心是融合蛋白没有洗下来...

你去买，就买你这个MBP的溶解酶，只要知道什么堵了，剩下的事情很好做的，
赞一下 回复此楼
8楼2013-04-17 11:57:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyan20220

木虫 (著名写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by liu2011 at 2013-04-17 11:57:46
你去买，就买你这个MBP的溶解酶，只要知道什么堵了，剩下的事情很好做的，...

具体怎么用溶解酶做啊？先把柱子用水洗，然后注入样品环里再注进柱子吗
赞一下 回复此楼
9楼2013-04-18 16:33:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liu2011

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by liyan20220 at 2013-04-18 16:33:38
具体怎么用溶解酶做啊？先把柱子用水洗，然后注入样品环里再注进柱子吗...

你直接配置后冲洗柱子
赞一下 回复此楼
10楼2013-04-22 12:50:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 liyan20220 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 7/350 2026-09-01 15:18 by myrtle
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗？ +4 瞬息宇宙 2026-08-31 4/200 2026-09-01 14:58 by jiaoxg
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 8/400 2026-09-01 12:58 by ssyjh
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 国社科又开始会评了，不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 为什么到现在没收到通知？ +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭