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shenwuyan铁虫 (初入文坛)
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请问TEV酶怎么保存？
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我表达纯化了一批tev酶，纯度和浓度都挺高的。 但是洗脱下来的tev酶在500mM咪唑中，用洗脱液稀释到OD280=2，约有40ml； 为了保存，需去咪唑，用1L如下透析液4°C透析过夜： 50 mM Tris HCl pH=7.5 plus 1 mM EDTA, 5 mM DTT 结果第二天一看，一大坨一大坨的沉淀！！！  离心后取上清测OD280，仅有0.2左右。 看到别人protocol这么写： “Do not concentrate TEV protease too much (0.5 - 1 mg/ml) Spin 10,000 rpm for 20 min Take supernatant Add glycerol for storage at -80oC. ” 我用10k的膜浓缩，堵膜，一下午几乎没有浓缩多少。 现在就很疑惑，洗脱下来 在高浓度咪唑中的tev酶该怎么处理并保存？越详细越好 |
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