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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 凝血酶稀释及保存问题
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498243829

金虫 (初入文坛)

[求助] 凝血酶稀释及保存问题

购得凝血酶浓度较大，做实验需要pM/fM等较低浓度的，用什么来稀释既方便使用又能长期保存？
摆脱给位高人指点指点吧！
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1楼2012-01-02 19:48:40
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回帖置顶 ( 共有2个 )

更深的蓝

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): Good！ 2012-01-04 18:36:05
西瓜: 回帖置顶 2012-01-04 18:36:07
498243829(金币+5): 2012-01-05 12:52:50
就用普通的缓冲液就可以了，你用甘油1：1也可以。比如你配好1ml 100uM 凝血酶母液，用PCR管分装，每管10uL,分装几十管，每次实验，用一只，这样既能避免反复冻融，又可节省试剂。
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低调务实！
4楼2012-01-04 17:01:30
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498243829

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by 更深的蓝 at 2012-01-04 17:01:30:
就用普通的缓冲液就可以了，你用甘油1：1也可以。比如你配好1ml 100uM 凝血酶母液，用PCR管分装，每管10uL,分装几十管，每次实验，用一只，这样既能避免反复冻融，又可节省试剂。

普通的缓冲保存能维持凝血酶的活性吗？仁兄所谓普通缓冲是?能给个具体的配方吗？谢谢啦！
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5楼2012-01-04 21:58:07
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更深的蓝

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木(金币+2): 鼓励应助。蓝蓝，是做这个的吧 2012-01-03 11:13:14
你可以配高浓度的凝血酶母液，小体积分装，然后-20℃冷冻，做实验的时候拿出一支来稀释。
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低调务实！
2楼2012-01-03 10:40:27
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498243829

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by 更深的蓝 at 2012-01-03 10:40:27:
你可以配高浓度的凝血酶母液，小体积分装，然后-20℃冷冻，做实验的时候拿出一支来稀释。

用什么来配制高浓度溶液合适呀？我现用的是水和甘油1：1的溶液配的，用时直接用水稀释到浓度，用完就扔了！不知合适否？且这样每次试验挺浪费的，您能给个好的建议吗？拜托拜托啦！
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3楼2012-01-04 15:44:04
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更深的蓝

木虫 (正式写手)
我用的是10mMTris-Cl,pH7.4,100mMNaCl.别人用水配的也有活性。
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低调务实！
6楼2012-01-05 19:43:57
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zjlshsh

新虫 (初入文坛)
用1%氯化钙溶液稀释后分装-5度冷冻储存
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7楼2013-01-07 11:31:07
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