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北国雪91

铁虫 (小有名气)

[求助] 求助,花色苷的液相峰只有三个

小妹做红树莓花色苷的,确定这是一种混合的色素,看别的文献都能够分析出好几种物质,至少也有四种,而且峰高差别也没这么大,可是我跑液相就只有三个峰,其中两个很高几乎各占50%,另一个很低,只占1%左右。到底是怎么回事呢,是我的果实中只有这三种物质,还是条件不对呢? 液相条件:0min:12%,14,in:20%,16min:25%,22min:25%,35min:40%,40min:12%,45min12%。这是B相的比例。A相为2%的甲酸水溶液,B相为2%的乙腈。
    很想知道,是因为我的峰没有分开,还是只是有这三种物质,好纠结啊,感觉是自己没跑出其他的东西来。
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notingisimpossible
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sunday1975

铜虫 (初入文坛)

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北国雪91: 金币+5, 有帮助 2013-04-08 19:57:00
不同溶剂提出的东西不一样吧,换种溶剂再提再分析试试

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
坚持
2楼2013-04-07 22:35:25
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anyluk

主管区长 (文坛精英)

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【答案】应助回帖

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北国雪91: 金币+5 2013-04-08 19:57:09
酸的浓度调成千分之一试试,柱子平衡好。洗脱条件可以慢慢调整。洗脱条件也不合理。
精益求精
3楼2013-04-08 08:24:20
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北国雪91

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by sunday1975 at 2013-04-07 22:35:25
不同溶剂提出的东西不一样吧,换种溶剂再提再分析试试

不同浓度的乙醇提,甲醇提,水提,甲醇提乙醇溶,还有过柱不过柱都试过了。应该不是提取的问题了。我想是不是有峰没跑出来呢?那两个很大的峰会不会是几种的物质在一起呢
notingisimpossible
4楼2013-04-08 08:46:04
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北国雪91

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by anyluk at 2013-04-08 08:24:20
酸的浓度调成千分之一试试,柱子平衡好。洗脱条件可以慢慢调整。洗脱条件也不合理。

文献上面最低的酸度也在1%,主要是想保护花色苷不分解,酸性条件才合适。应该不是酸的问题,我调过0.5%,结果也是一样的
notingisimpossible
5楼2013-04-08 08:47:45
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anyluk

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【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 北国雪91 at 2013-04-08 08:47:45
文献上面最低的酸度也在1%,主要是想保护花色苷不分解,酸性条件才合适。应该不是酸的问题,我调过0.5%,结果也是一样的...

那就是柱子的问题了。
精益求精
6楼2013-04-08 08:48:21
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北国雪91

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by anyluk at 2013-04-08 08:48:21
那就是柱子的问题了。...

额,用的反向C18,安捷伦的柱子
notingisimpossible
7楼2013-04-08 08:49:22
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anyluk

主管区长 (文坛精英)

国家高级公共营养师

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引用回帖:
7楼: Originally posted by 北国雪91 at 2013-04-08 08:49:22
额,用的反向C18,安捷伦的柱子...

反向柱子很多,看柱子的键合基团及极性。还是你原料提取时浓度太大了。或者进样量浓度过大。
精益求精
8楼2013-04-08 09:21:37
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waq0012

捐助贵宾 (小有名气)

【答案】应助回帖

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北国雪91: 金币+5 2013-04-08 19:57:22
检查一下丰度高的峰是否苷元峰。如果是,则可能提取过程中温度过高,花色苷在高酸度下发生降解,生成苷元,含量较少的花色苷的峰就看不见了;或原料处置不当,花色苷被酶水解成苷元。
生活就是修行
9楼2013-04-08 17:48:05
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北国雪91

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by waq0012 at 2013-04-08 17:48:05
检查一下丰度高的峰是否苷元峰。如果是,则可能提取过程中温度过高,花色苷在高酸度下发生降解,生成苷元,含量较少的花色苷的峰就看不见了;或原料处置不当,花色苷被酶水解成苷元。

谢谢,今天重新调整了一下梯度和色素的溶剂,跑出的结果还不错。谢谢大家的帮助!
notingisimpossible
10楼2013-04-08 19:54:38
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