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xiaojo

新虫 (初入文坛)

[求助] PAGE胶银染条带不清晰 已有1人参与

最近在做PAGE电泳,银染效果不太清晰,去年秋天的时候效果还可以,到了冬天就基本染不出条带,就觉得可能是温度降低影响了染色效果,现在温度都在零上十几度,但是银染效果还是不及之前做的。也想不出是什么原因,希望有经验的战友指点下,现将之前和现在做的图片放上。
       我用的是6%非变性聚丙烯酰胺凝胶,ACR/BIS是29:1,200ml体系中加2ml APS和200微升TEMED,凝聚1个多小时预电泳。
       银染配方及步骤:
           1.在蒸馏水中漂洗4-5min;
           2.在染色液中振荡8-10min(染色液组成:10%无水乙醇,1%冰醋酸,2g/L硝酸银,蒸馏水);
           3.蒸馏水中漂洗5-10s;
           4.显色液中振荡至条带清晰(显色液组成:30g/LNaOH,0.67%甲醛,蒸馏水)

IMG_5036.jpg



IMG_5441.jpg
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lililala

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
1楼: Originally posted by xiaojo at 2013-04-05 16:59:46
最近在做PAGE电泳,银染效果不太清晰,去年秋天的时候效果还可以,到了冬天就基本染不出条带,就觉得可能是温度降低影响了染色效果,现在温度都在零上十几度,但是银染效果还是不及之前做的。也想不出是什么原因,希 ...

放保温箱里调高温度试一下。。

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2楼2016-11-30 08:20:56
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嘉飞猫baq

新虫 (初入文坛)

您好,您问题解决了么、我最近跟您遇到了同样的问题1求助
不想做功课的工科男
3楼2019-08-20 10:58:58
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