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等我的鱼

至尊木虫 (知名作家)

[求助] 纳米粒电泳跑成这样,为甚么?

一个带正电的纳米粒,与一个小片段的基因孵育,基因恒定,纳米粒不同比例上电泳。最左边的是空白基因对照。
为什么会拖尾?
为什么条带不在一条线上?
为什么加样槽会有微小的上移?

电泳条件试过60V,温度控制的很好,样品新的。
求解释。

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scncwxy

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
fool_proof: 金币+1, 欢迎常来生物材料版应助交流~ 2013-04-02 18:58:34
等我的鱼: 金币+10, ★★★很有帮助, 前辈,再给我出点主意啊! 2013-04-02 22:30:08
等我的鱼(红舟流星代发): 金币+20, 代扣代发金币 2013-04-11 23:53:36
你是在考察聚阳离子的包载基因的能力吧,DNA可能不纯有拖尾,不在一条线上可能是因为小N/P下,材料不能完全包裹DNA,会随着一起移动,但因整体分子量变大会使距离变短
2楼2013-04-02 18:15:46
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等我的鱼

至尊木虫 (知名作家)

引用回帖:
2楼: Originally posted by scncwxy at 2013-04-02 18:15:46
你是在考察聚阳离子的包载基因的能力吧,DNA可能不纯有拖尾,不在一条线上可能是因为小N/P下,材料不能完全包裹DNA,会随着一起移动,但因整体分子量变大会使距离变短

基因是上海那边公司纯化的,我看是HPLC级别的,以前跑的丙烯酰胺凝胶也没这样子,还有别的原因吗?
但是2%的琼脂糖凝胶电泳,100nm的粒子能进空隙吗???
3楼2013-04-02 18:34:51
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scncwxy

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


黄酮: 金币+1, 谢谢回帖交流 2013-04-02 21:33:10
我一般是用1%的琼脂糖跑,其实不在一条线上没关系,这个实验就是要确定完全包裹基因材料的量,从你的图上看,第六孔能包裹住
4楼2013-04-02 18:38:49
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等我的鱼

至尊木虫 (知名作家)

引用回帖:
4楼: Originally posted by scncwxy at 2013-04-02 18:38:49
我一般是用1%的琼脂糖跑,其实不在一条线上没关系,这个实验就是要确定完全包裹基因材料的量,从你的图上看,第六孔能包裹住

但我要拿到文章上去啊,这样编辑会问的?很难解释清楚
而且,我看别人也没拖尾拖成这样的啊
5楼2013-04-02 18:40:20
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huquan0_0

捐助贵宾 (正式写手)

在做一遍  重新
海纳百川有容乃大;自强不息止于至善。
6楼2013-04-02 21:22:59
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等我的鱼

至尊木虫 (知名作家)

引用回帖:
6楼: Originally posted by huquan0_0 at 2013-04-02 21:22:59
在做一遍  重新

已经N遍了,都试了一个礼拜的条件了。。。。
7楼2013-04-02 22:29:01
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conanzzz

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
黄酮: 金币+1, 谢谢回帖交流 2013-04-03 09:57:06
等我的鱼: 金币+10, ★★★很有帮助, 希望大神再提一些意见 2013-04-03 12:49:40
等我的鱼(红舟流星代发): 金币+20, 代扣代发金币 2013-04-11 23:53:30
右边是纳米粒自带荧光还是核酸染的色?另外上样量是不是多了?
8楼2013-04-03 08:55:03
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等我的鱼

至尊木虫 (知名作家)

引用回帖:
8楼: Originally posted by conanzzz at 2013-04-03 08:55:03
右边是纳米粒自带荧光还是核酸染的色?另外上样量是不是多了?

核酸染色,上样量考察过了,开始10ul,后来上的5ul,电压什么的都考察过了
9楼2013-04-03 09:51:05
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conanzzz

木虫 (正式写手)

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fool_proof: 金币+1, 欢迎常来生物材料版应助交流 2013-04-03 12:48:38
黄酮: 金币+1, 谢谢回帖交流 2013-04-11 14:26:17
引用回帖:
9楼: Originally posted by 等我的鱼 at 2013-04-03 09:51:05
核酸染色,上样量考察过了,开始10ul,后来上的5ul,电压什么的都考察过了...

按照你图片放置的位置,第一道应该纯核酸对吧?核酸跑成这样是不应该的,但是如果是混入了荧光纳米粒,那就很像~~但你又说不是纳米粒的荧光,那我单纯猜测一下哈,是不是纳米粒本身有基团可以被核酸染料染色?有没有单纯跑一个纳米粒试试?
另外,100nm的球在2%的胶里应该不能出孔~
10楼2013-04-03 10:29:10
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