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等我的鱼

至尊木虫 (知名作家)

[求助] 纳米粒电泳跑成这样,为甚么?

一个带正电的纳米粒,与一个小片段的基因孵育,基因恒定,纳米粒不同比例上电泳。最左边的是空白基因对照。
为什么会拖尾?
为什么条带不在一条线上?
为什么加样槽会有微小的上移?

电泳条件试过60V,温度控制的很好,样品新的。
求解释。

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等我的鱼

至尊木虫 (知名作家)

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2楼: Originally posted by scncwxy at 2013-04-02 18:15:46
你是在考察聚阳离子的包载基因的能力吧,DNA可能不纯有拖尾,不在一条线上可能是因为小N/P下,材料不能完全包裹DNA,会随着一起移动,但因整体分子量变大会使距离变短

基因是上海那边公司纯化的,我看是HPLC级别的,以前跑的丙烯酰胺凝胶也没这样子,还有别的原因吗?
但是2%的琼脂糖凝胶电泳,100nm的粒子能进空隙吗???
3楼2013-04-02 18:34:51
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等我的鱼

至尊木虫 (知名作家)

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4楼: Originally posted by scncwxy at 2013-04-02 18:38:49
我一般是用1%的琼脂糖跑,其实不在一条线上没关系,这个实验就是要确定完全包裹基因材料的量,从你的图上看,第六孔能包裹住

但我要拿到文章上去啊,这样编辑会问的?很难解释清楚
而且,我看别人也没拖尾拖成这样的啊
5楼2013-04-02 18:40:20
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等我的鱼

至尊木虫 (知名作家)

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6楼: Originally posted by huquan0_0 at 2013-04-02 21:22:59
在做一遍  重新

已经N遍了,都试了一个礼拜的条件了。。。。
7楼2013-04-02 22:29:01
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等我的鱼

至尊木虫 (知名作家)

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8楼: Originally posted by conanzzz at 2013-04-03 08:55:03
右边是纳米粒自带荧光还是核酸染的色?另外上样量是不是多了?

核酸染色,上样量考察过了,开始10ul,后来上的5ul,电压什么的都考察过了
9楼2013-04-03 09:51:05
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等我的鱼

至尊木虫 (知名作家)

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10楼: Originally posted by conanzzz at 2013-04-03 10:29:10
按照你图片放置的位置,第一道应该纯核酸对吧?核酸跑成这样是不应该的,但是如果是混入了荧光纳米粒,那就很像~~但你又说不是纳米粒的荧光,那我单纯猜测一下哈,是不是纳米粒本身有基团可以被核酸染料染色?有没有单纯跑 ...

纳米粒没有荧光的
还有其他原因么。。。。
11楼2013-04-03 12:49:04
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等我的鱼

至尊木虫 (知名作家)

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12楼: Originally posted by conanzzz at 2013-04-11 14:01:53
也许像前面同学说的,你这个是材料慢慢包覆\粒子由小变大(电荷慢慢中和)的过程?毕竟到后面核酸染色位置都有往反方向跑得趋势了~...

问题算是解决了吧,换了台仪器,就好多了。
13楼2013-04-11 18:12:39
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