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caidan1385

新虫 (初入文坛)

[求助] T-DNA LB和RB

我用热不对称方法扩增pPK2载体转化真菌得到的转化子的T-DNA整合位点侧翼序列;上游简并引物和下游特异性序列(RB区域)都是别人文献当中用过的,但是第三轮引物扩增的结果1000bp左右,经测序结果验证依然是PBI121的序列(RB区域上游)。我一直以为pPK2整合特点是从RB和LB区域断开,整合到植物基因组中,但是我扩增出的结果又好像不是。求解,请各位大侠帮帮忙!还有一般大家是用哪种方法扩增T-DNA整合位点侧翼序列的? 求pPK2载体T-DNA LB和RB的巢式引物,非常感谢,邮箱caidan1385@126.com
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gyesang

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【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
Tail-PCR比较复杂啦,我之前有克隆过很多T-DNA的侧翼序列,用的是i-PCR的方法,效率还是可以的啊,楼主可以换换克隆方法
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2013-04-02 20:03:08
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