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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 初学者，想问下：T-DNA 插入突变体的纯合体鉴定
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denzil

木虫 (小有名气)

[求助] 初学者，想问下：T-DNA 插入突变体的纯合体鉴定

T-DNA 插入突变体的纯合体鉴定，是做什么的？ 为什么要做这个实验呢
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人生应该如蜡烛一样,从顶燃到底,一直都是光明的
1楼 2013-01-07 18:11:51
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励积极发帖帮助解答问题。 2013-01-07 20:50:34
denzil: 金币+5, ★★★很有帮助, 多谢 2013-01-09 20:16:12
T-DNA插入后，有时候可能获得结果是杂合的，也就是你的目的基因并没有被完全破坏，因此你需要设计一个PCR体系去鉴定一下
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
2楼2013-01-07 19:07:46
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xy656691

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★
gyfgood: 金币+5, 有帮助！ 2013-01-08 20:26:57
需要三对引物，LB，LP，RP来扩增，通过对扩增结果就行电泳检测，来确定是否为纯合体，杂合体，或者是野生型。
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3楼2013-01-07 21:32:03
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denzil

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2013-01-07 19:07:46
T-DNA插入后，有时候可能获得结果是杂合的，也就是你的目的基因并没有被完全破坏，因此你需要设计一个PCR体系去鉴定一下

是不是说，T-DNA插入到目的基因，就表明是纯和的？
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人生应该如蜡烛一样,从顶燃到底,一直都是光明的
4楼2013-01-09 21:38:35
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xy656691

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by denzil at 2013-01-09 21:38:35
是不是说，T-DNA插入到目的基因，就表明是纯和的？...

不是。有可能插入一条链，这就不是纯和的
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5楼2013-01-12 22:38:59
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denzil

木虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by xy656691 at 2013-01-12 22:38:59
不是。有可能插入一条链，这就不是纯和的...

嗯，多谢
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6楼2013-01-14 18:47:45
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ggyu118

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by xy656691 at 2013-01-12 22:38:59
不是。有可能插入一条链，这就不是纯和的...

杂合体就是T-DNA只插入DNA的一条链，而不是只插入一个等位基因，是吗
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7楼2014-03-01 15:11:17
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匿名

用户注销 (初入文坛)
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8楼2014-12-05 11:10:35
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xy656691

金虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 一个人一棵树 at 2014-12-05 11:10:35
你好，你知道CS编号的突变体的LB是怎么确定的吗？...

理论上就是所插入T-DNA序列的左边界。
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9楼2014-12-06 10:57:50
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