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denzil

木虫 (小有名气)

[求助] 初学者,想问下:T-DNA 插入突变体的纯合体鉴定

T-DNA 插入突变体的纯合体鉴定,是做什么的? 为什么要做这个实验呢
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人生应该如蜡烛一样,从顶燃到底,一直都是光明的
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励积极发帖帮助解答问题。 2013-01-07 20:50:34
denzil: 金币+5, ★★★很有帮助, 多谢 2013-01-09 20:16:12
T-DNA插入后,有时候可能获得结果是杂合的,也就是你的目的基因并没有被完全破坏,因此你需要设计一个PCR体系去鉴定一下
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
2楼2013-01-07 19:07:46
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xy656691

金虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★
gyfgood: 金币+5, 有帮助! 2013-01-08 20:26:57
需要三对引物,LB,LP,RP来扩增,通过对扩增结果就行电泳检测,来确定是否为纯合体,杂合体,或者是野生型。
3楼2013-01-07 21:32:03
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denzil

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2013-01-07 19:07:46
T-DNA插入后,有时候可能获得结果是杂合的,也就是你的目的基因并没有被完全破坏,因此你需要设计一个PCR体系去鉴定一下

是不是说,T-DNA插入到目的基因,就表明是纯和的?
人生应该如蜡烛一样,从顶燃到底,一直都是光明的
4楼2013-01-09 21:38:35
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xy656691

金虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by denzil at 2013-01-09 21:38:35
是不是说,T-DNA插入到目的基因,就表明是纯和的?...

不是。有可能插入一条链,这就不是纯和的
5楼2013-01-12 22:38:59
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denzil

木虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by xy656691 at 2013-01-12 22:38:59
不是。有可能插入一条链,这就不是纯和的...

嗯,多谢
人生应该如蜡烛一样,从顶燃到底,一直都是光明的
6楼2013-01-14 18:47:45
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ggyu118

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by xy656691 at 2013-01-12 22:38:59
不是。有可能插入一条链,这就不是纯和的...

杂合体就是T-DNA只插入DNA的一条链,而不是只插入一个等位基因,是吗
7楼2014-03-01 15:11:17
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匿名

用户注销 (初入文坛)

本帖仅楼主可见
8楼2014-12-05 11:10:35
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xy656691

金虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 一个人一棵树 at 2014-12-05 11:10:35
你好,你知道CS编号的突变体的LB是怎么确定的吗?...

理论上就是所插入T-DNA序列的左边界。
9楼2014-12-06 10:57:50
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