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1338070201

新虫 (初入文坛)

[求助] 真核转染表达,求助

各位大神,我将我的蛋白克隆到一个带有puro抗性的真核质粒上,想筛选稳转。但是可能是我蛋白带有核酸内切酶活性的缘故,瞬时转染在293T细胞中都不表达。我想问问有什么解决方法,换质粒行吗?有哪些质粒可供选择?
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

想要构建稳定细胞系,这种情况的话,应该确定质粒有没有转进去,楼上说的对的,其次在考虑转染效率
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
6楼2015-11-09 17:08:10
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

不同的转染方法,可以参考 细胞转染方法比较,如果转进去了,在从转染方法上考虑,包括用的转染试剂,细胞的状态很多问题都要考虑啊
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
7楼2015-11-09 17:10:00
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