| 查看: 1459 | 回复: 0 | ||
lpr01木虫 (小有名气)
|
[求助]
求助 DNA 连接反应条件 E coli DNA连接酶
|
|
求各位专家帮忙,小硕做科研已经快一年的时间了,一直卡在两段DNA的连接上面, 希望大神指点,谢谢! 我的实验是这样的:有两端双链的DNA,他们的末端是相同的,都是G/AATTC,分别对应的是5’和3’端,5‘端修饰“P”磷酸基团,3’端修饰“OH”,现在想用E coli DNA连接酶将两端连接起来成为一条双链,但是总是做不出来,求解释。 我的反应条件是将开始两段双链DNA,混合在37度的孵化箱中互补反应1h,然后加入E coli 连接酶及其自带缓冲溶液,以及BSA,在孵化箱16度温育过夜。。。。 但是在上述的反应条件下,经验证没有连接起来,我想知道我的问题出在哪,或者有没有更好的反应条件,希望大家帮忙指点,万分感激!!!!! |
» 猜你喜欢
085602调剂 初试总分335
已经有7人回复
化学357分,考研调剂
已经有7人回复
278求调剂
已经有12人回复
085400电子信息319求调剂(接受跨专业调剂)
已经有6人回复
323求调剂
已经有7人回复
一志愿北京2,材料与化工308求调剂
已经有6人回复
26考研调剂0710 0860
已经有13人回复
296材料专硕求调剂
已经有22人回复
材料调剂
已经有12人回复
285求调剂
已经有5人回复
找到一些相关的精华帖子,希望有用哦~
全式金的T4 DNA 连接酶 效果怎么样??
已经有6人回复
DNA连接酶和内切酶的选用
已经有4人回复
DNA的连接反应
已经有5人回复
为什么连接这么难呢?
已经有54人回复
咨询个基因重组实验中问题
已经有4人回复
【求助/交流】聚乙二醇在连接反应中的作用
已经有18人回复
【求助/交流】DNA片段连接的温度和反应条件
已经有7人回复
【求助/交流】长片段的连接转化
已经有9人回复
微生物学考研资料1(沈萍版同步)免币分享
已经有67人回复
科研从小木虫开始,人人为我,我为人人














回复此楼
点击这里搜索更多相关资源