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汕头大学海洋科学接受调剂
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袁汝强

铜虫 (小有名气)

[交流] 96孔板如何培养金葡菌 已有4人参与

最近我在做抑菌试验,我用的是96孔板,可是在我加完菌液24小时后拿去测OD值时发现几乎每个加菌液的空下面都有沉淀的细菌,但是分布不均匀,这样是不是影响结果啊,为什么会有沉淀呢
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莹莹陀zws

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
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laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助! 2013-03-20 17:40:51
这种情况很正常,说明你的抗生素浓度不够。你看你的空白长的没,金葡是最好抑制的。
悲伤着你的悲伤,幸福着你的幸福
2楼2013-03-19 09:15:39
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younx

至尊木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
抗生素浓度不够,另一个菌量比较大,另外用96孔板测OD值是否应该每小时观察?
3楼2013-03-19 10:32:23
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袁汝强

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 莹莹陀zws at 2013-03-19 09:15:39
这种情况很正常,说明你的抗生素浓度不够。你看你的空白长的没,金葡是最好抑制的。

空白没有长菌,主要是我有菌的孔里,那些细菌都沉在孔底了,我之前用大肠杆菌做过,大肠杆菌都是悬浮在培养液里,很均匀。是不是金葡菌有问题,还是本来就这样。还有如果震荡一下,也可以混匀,96孔板测OD值前要震荡一下吗?我怕以震荡就会使别的孔里的菌或药震到其他的孔里
如果世间太多繁华,那就聆听吧
4楼2013-03-19 23:18:25
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袁汝强

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by younx at 2013-03-19 10:32:23
抗生素浓度不够,另一个菌量比较大,另外用96孔板测OD值是否应该每小时观察?

我是20小时后测得OD值?还有在这期间在37度的孵箱里要震摇吗?还是静置培养?我的药梯度稀释,第一个梯度是25mg/ml应该很大了吧。我的细菌浓度是把摇好的菌稀释了1000倍。
如果世间太多繁华,那就聆听吧
5楼2013-03-19 23:24:00
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莹莹陀zws

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 袁汝强 at 2013-03-19 23:18:25
空白没有长菌,主要是我有菌的孔里,那些细菌都沉在孔底了,我之前用大肠杆菌做过,大肠杆菌都是悬浮在培养液里,很均匀。是不是金葡菌有问题,还是本来就这样。还有如果震荡一下,也可以混匀,96孔板测OD值前要震 ...

金葡本来就是这样,我做过,菌体多了自然有沉淀,不用震荡
悲伤着你的悲伤,幸福着你的幸福
6楼2013-03-20 08:02:25
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younx

至尊木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by 袁汝强 at 2013-03-19 23:24:00
我是20小时后测得OD值?还有在这期间在37度的孵箱里要震摇吗?还是静置培养?我的药梯度稀释,第一个梯度是25mg/ml应该很大了吧。我的细菌浓度是把摇好的菌稀释了1000倍。...

抗生素浓度25mg/ml就太大了啊,25μg还差不多啊。

1000倍稀释浓度也还是大,不过得需要连续观察,每隔1小时或2小时的

96孔板的孔也就装2ml吧,震摇的话就放在微量振荡仪上吧

有沉淀的话用枪头混匀一下
7楼2013-03-20 08:38:35
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袁汝强

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 莹莹陀zws at 2013-03-20 08:02:25
金葡本来就是这样,我做过,菌体多了自然有沉淀,不用震荡...

哦,谢谢
如果世间太多繁华,那就聆听吧
8楼2013-03-21 09:43:52
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袁汝强

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by younx at 2013-03-20 08:38:35
抗生素浓度25mg/ml就太大了啊,25μg还差不多啊。

1000倍稀释浓度也还是大,不过得需要连续观察,每隔1小时或2小时的

96孔板的孔也就装2ml吧,震摇的话就放在微量振荡仪上吧

有沉淀的话用枪头混匀一下...

说错了,我的药初浓度是2.5然后倍比稀释9个梯度,由于我用的不是抗生素,只是实验合成的一些化合物,所以初浓度高了点,谢谢你的回复
如果世间太多繁华,那就聆听吧
9楼2013-03-21 09:48:50
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15280424614

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by 莹莹陀zws at 2013-03-20 08:02:25
金葡本来就是这样,我做过,菌体多了自然有沉淀,不用震荡...

金葡菌是沉淀生长么?我现在也遇到这种情况,导致测OD都偏低。以为金葡状态不好,长不起来
10楼2018-06-02 19:35:51
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